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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
CD27 Others Human 人 CD27 / TNFRSF7 人细胞裂解液 (阳性对照) 素粉质量规格：>98%,进分Tetrodotoxin

小鼠脑脊神经元MN-rAC-DC亚1酰胺单体质量规格：>97%,BRAc-dC Phosphoramidite

LGMN Others Sus scrofa (Pig) 野猪 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,2'-脱水-5-尿苷质量规格：>97%,BR2,2'-Anhydro-5-Me-U

人胚肾细胞;293 [HEK-293]7-DEAZA-7--2'-脱氧鸟苷质量规格：>97%7-Deaza-7-I-2’-dG

正常大鼠肾细胞;NRK-52E 胸膜细胞瘤，SMC-1细胞 RIN-m细胞，褐鼠瘤上皮细胞和厚朴酚质量规格：≥98%,BRHonokiol
EB病毒转化的人B细胞;KM9803氢氧化铝(>98%,BR)质量规格：>98%,BRAluminum hydroxide

CD59 Others Rat 大鼠 CD59 / CD59A / MAC / IP 人细胞裂解液 (阳性对照) 1酸铵三水(>98%,BR)质量规格：>98%,BRAmmonium phosphate, tribasic , trihydrate

人内膜上皮细胞*培养基 100mL雷帕霉素/西罗莫司（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Rapamycin(Sirolimus)

FO细胞，小鼠骨髓瘤细胞 3T6-Swiss albino(胚胎成纤维细胞) 人脐静脉内皮细胞(人膀胱癌细胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]甲磺酸雷沙吉兰质量规格：>98.5%Rasagiline Mesylate

CXCL9 Protein Mouse 重组小鼠 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白白藜芦醇质量规格：>97.0%,BRResveratrol
CD93 Others Human 人 CD93 / C1QR1 人细胞裂解液 (阳性对照) 猪血红蛋白容量：RT25克

MG-63 人成骨肉瘤细胞5--1-基四氮坐 98% 5-Mqrccpto-1-mqthyltqtrczolq 13183-79-4

SK-MES-1人肺鳞癌细胞 SK-MES-1 human lung squamous carcinoma cells MEM培养基(GIBCO)+10%FBS硬脂酸容量：5克

EPO Protein Rat 重组大鼠 Erythropoietin / EPO 蛋白 (His 标签)羧琼脂糖凝胶CL-6B5克

SV40T转化的人胚肾细胞(亚系);293T/17 人呼吸道上皮细胞*培养基 100mL(假单胞杆菌分离琼脂)
铜－ATP酶Cu2+－ATPase测试盒人膀胱癌细胞;5637(HTB-9)番泻苷C（标准品）Sennoside C质量规格：HPLC≥98%，标准品

HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Florida/4/2006) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 番泻苷D（标准品）Sennoside D质量规格：HPLC≥98%，标准品

MDA-MB-435S 人导管癌细胞二氢辣椒碱（标准品）Dihydrocapsaicin质量规格：HPLC≥98%，标准品

A549人非小细胞肺癌细胞 A549 cells in human non small cell lung cancer F-12K+10% FBS五味子酯乙（标准品）Schizandrol B质量规格：HPLC≥98%，标准品

MDK Protein Human 重组人 Midkine / MDK 蛋白柴胡皂苷B1（标准品）SaikosaponinB1质量规格：HPLC≥98%，标准品
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。