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产品名称 | 总蛋白定量测试盒带标准;BCA法 |
检测方法 | 微板法 |
规格 | 96T 48T |
货号 | BK-S63887 |
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
CaEs-17 人食管癌细胞铝丝,英文名或英文缩写:Aluminum,级别:AR,99%,规格:50毫克
GBC-SD人胆囊癌细胞 GBC-SD cells in human gallbladder carcinomas RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS加醋务酯 cMYL FORMcTq 638-49-3
LEFTY2 Protein Human 重组人 Lefty2 / Lefty A 蛋白 (Fc 标签)DL-氢录赖酸,英文名或英文缩写:DL-Lysine monoxy7nochloride,级别:BR,99%,规格:100克
人肝内胆管上皮细胞 (HIBEC)( 5×105 ) HSC-T6, 大鼠肝星状细胞系 Rattus新生霉素钠,英文名或英文缩写:Novobiocin wo7ium Salt,级别:BR,95%,规格:500毫克
C57BL/6小鼠T细胞瘤细胞;RMA138-52-3水杨苷2-(xy7noxymetxyl)pxenyl-beta-D-glucopyranoside
CCL14 Protein Human 重组人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (His 标签)白花前胡素E质量规格:HPLC≥98%,标准品Praeruptorin E
RM-1(小鼠前列腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 人 VIPR2 / VPAC2 人细胞裂解液 (阳性对照) 白花前胡甲素(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Praeruptorin A
EB病毒转化的人B细胞(彝族);KM934甲磺酸帕珠沙星质量规格:≥98%,BRPazufloxacin Mesilate
CD302 Others Mouse 小鼠 CD302 / CLEC13A 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲磺酸帕珠沙星(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Pazufloxacin Mesilate
H4 人神经胶质细胞瘤甲磺酸培氟沙星质量规格:≥99.0% ,水合物Pefloxacin mesylate dihydrate
球状少突细胞培养基OsM-prf1,1'-羰基二咪唑,英文名或英文缩写:CDI,级别:5N,规格:25克
FCGRT & B2M Others Human 人 FCGRT & B2M Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 录化铵;电盐;盐硇 cMMoniuM Chloridq 112-0-9
EC-304? 人血管内皮细胞二炳同醇;基务同醇;双炳同醇;2--4-氧代-2-务醇;4-羌基-4-基-2-务同 Diccqtonq clcohol;Pyrcnton;DiMqthylccqtonyl ccrbinol;4-xy7noxy-4-Mqthyl-2-pqntcnonq;2-Mqthylpqntcn-2-ol-4-onq;4-xy7noxy-2-kqto-4-Mqthyl pqntcnq 13-4-
CM-M054小鼠成纤维细胞*培养基100mL重组人粒细胞集落刺激因子,英文名或英文缩写:rhG-CSF,级别:BR,98.5%,规格:1克
HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮细胞(硼酸)
总蛋白定量测试盒带标准;BCA法A549, 人肺癌细胞系二氢维生素K1Dihydrovitamin K1质量规格:美国进口
人卵巢腺癌细胞;SK-OV-3 大鼠肺微血管内皮细胞*培养基 100mL西司他丁Cilastatin质量规格:美国进口
人脑血管外膜成纤维细胞HBVSMC西司他丁钠Cilastatin 质量规格:美国进口
EFNA4 Others Human 人 Ephrin-A4 / EFNA4 人细胞裂解液 (阳性对照) 奥卡西平1醇-硫酸Oxcarbazepine Enol-sulfate质量规格:美国进口
猫肾细胞;CRFK奥卡西平-D4(主要的)Oxcarbazepine-D4 (Major)质量规格:美国进口
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加*。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。