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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
Caco-2，人结直肠腺癌细胞枸橼酸氯米芬（标准品）质量规格：含量测定Clomiphene

EB病毒转化的人B细胞;KMY0922 人表皮角质形成细胞*培养基 100mL甲磺酸双氢毒碱（标准品）质量规格：含量测定Dihydroergotoxine mesylate

小鼠肾集合管细胞(SV40转化);M-16-醛基异麦冬黄烷酮A(标准品)质量规格：HPLC≥98%,标准品6-Aldehydoisoophiopogonanone A

C10ORF54 Others Human 人 B7-H5 / Gi24 / VISTA 人细胞裂解液 (阳性对照) 氯普噻吨（标准品）质量规格：检查Chlorprothixene

U-87 MG人脑星形胶质母细胞瘤 U-87 MG of brain asocytic blastoma DMEM+10% FBS甲羟孕酮-d3质量规格：美国进口Medroxyprogesterone-d3
RKO-E6人结肠癌转基因细胞 Human colon cancer RKO-E6 ansgenic cells MEM培养基(GIBCO)+10%FBS甲磺酸培氟沙星（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Pefloxacin mesylate dihydrate

TNFSF13B Protein Human 重组人 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白培美曲塞二钠质量规格：>99%,BR,水合物Pemetrexed Di

人脐带间叶干细胞(脐带)(HUMSC) (5×105) AGS人胃腺癌细胞 Human利奥西呱，BAY 63-2521质量规格：>98%,可溶性鸟苷酸环化酶激 (sGC)活剂Riociguat

EB病毒转化的人B细胞(彝族);HYL马来酸非尼拉敏质量规格：>98%,BRPheniramine Maleate

MYOC Others Human 人 MYOC / Myocilin 人细胞裂解液 (阳性对照) DANSYL-GCVLS质量规格：>98%,进分FTase Substrate, Fluorogenic
人肺动脉内皮细胞裂解物HPAECLBASICFUCHSIN,CERTIFIED碱性品红生物染料级5G632-99-5RT

CD53 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD53 (aa 107-181) 人细胞裂解液 (阳性对照) 双-基氧本酚氧本基三嗪 BqMotrizinol 187393-00-6

小鼠骨髓细胞;FDC-P1CPA-mA偶氮录膦mA100克色固

LM-6细胞，人肝癌细胞系 小鼠白血病细胞,L1210细胞 兔主动脉平滑肌细胞;SMCL-THREONINEL-苏酸美国药典级500G72-19-5RT

MA-782(小鼠癌细胞) 5×106cells/瓶×2(N-乙酰-D-半乳糖胺)
总蛋白定量测试盒带标准；考马斯亮蓝法人APP基因转染CHO细胞株;7WD10 食管癌细胞，Eca-109细胞 IBRS-2细胞，猪肾细胞系二氢酮酸甲酯(植物激素级)Methyl dihydrojasmonate质量规格：>90%,植物激素级

人胚肺成纤维细胞;MRC-5吲哚-4-羧酸甲酯(>98%，BR)Methyl indole-4-carboxylate质量规格：>98%，BR

HA Others H15N8 甲型流感 H15N8 (A/duck/AUS/341/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 绿(~65%,BS)Methylene green zinc chloride double salt质量规格：~65%,BS

人脑血管平滑肌细胞RNAHBCSMC miRNA5 μg亚甲紫3RAX(>90%，BS)Methylene violet 3RAX质量规格：>90%，BS

小鼠条纹神经细胞(MN-s)(1×106)2-琥珀酸(>98%,BR)Methylsuccinic acid质量规格：>98%,BR
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。