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土壤植酸酶测试盒可见分光光度法
参考价:

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更新时间:2023-12-24  |  阅读:648

详情介绍

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:土壤植酸酶测试盒可见分光光度法

产品规格:50管/24样

检测方法:可见分光光度法

产品货号:BK-01S6922

产品分类:土壤系列
商品介绍:

测定意义:

植酸酶(phytase)是催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸(盐)的一类酶的总称,属磷酸单酯水解酶,它能将食品和饲料中植酸及其盐转化为可供有机体利用的有效磷,降低粪便中的磷含量,减轻对环境的污染,改善营养成分的吸收和利用,因此具有极其广泛的研究和应用价值。

测定原理

植酸酶在一定温度和pH值条件下,水解底物植酸钠生成无机磷与肌醇衍生物,无机磷在酸性环境中与钼酸铵显色剂反应生成蓝色复合物,在700nm处有特征吸收峰,根据700nm处吸光值变化可计算得植酸酶活性。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅,甲苯(不允许快递)。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

50T 羊伪结核棒状杆菌PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

200 mL 人白细胞分离液1.078 Cell Separation Solution -20℃保存

25mL Laemmli’s (SDS-Sample) Buffer (reducing,4X)   Laemmli’s (SDS-Sample) Buffer (reducing,4X)   常温保存

1 mg Quin-2 AM Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

2 ug pLentiCRISPR cas9 v.2 pLentiCRISPR cas9 v.2 低温运输,-20℃保存

HC琼脂基础 HC Agar Base 250g

1瓶 MNNG/HOSCl#5 [R-1059-D]细胞株 MNNG/HOSCl#5 [R-1059-D] 低温运输和保存

A1 A1 Medium 250g

500mg 人血清白蛋白 V Albumin Human Serum, FractionⅤ 4℃保存

100mL Transformation Buffer-1  Transformation Buffer-1  常温保存

100µL 小鼠抗SUMO标签蛋白单抗 Anti SUMO-Tag Mouse MAb -20℃保存

土壤植酸酶测试盒可见分光光度法Phospho-NFKB p65(Ser276)  磷酸化细胞核因子NF-κB p65抗体 规格: 0.1ml

TNF-alpha(1F6)  瘤坏死因子-α单克隆抗体 规格: 0.1ml

ATP citrate lyase/ACLY  三磷酸柠檬酸裂解抗体 规格: 0.2mlPhospho-NPM (Thr199)  磷酸化核仁磷酸蛋白抗体 规格: 0.1ml

phospho-eIF4EBP1/2/3(Thr36)  磷酸化4E结合蛋白1,2,3抗体 规格: 0.1mlphospho-Rb(Ser249)  视网膜母细胞瘤相关蛋白1抗体 规格: 0.1ml

Phospho-FoxO3a (Ser318/321)  磷酸化叉蛋白3A抗体 规格: 0.1mlPhospho-HSL (Ser863)  磷酸化荷尔蒙敏脂肪抗体 规格: 0.1ml

RASL/RASL10A  Ras样蛋白家族10A抗体 规格: 0.2mlAdenylosuccinate Lyase  苷酸琥珀酸裂解抗体 规格: 0.2ml

Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-CY5  PE-CY5标记的兔抗小鼠k链 规格: 0.1mlCDK7  周期素依赖性激7抗体 规格: 0.1ml

SFRP1  分泌型卷曲相关蛋白1抗体 规格: 0.1mlC11orf74  11号染色体开放阅读框74抗体 规格: 0.2ml

phospho-C-Myc(Thr373)  磷酸化致基因C-Myc抗体 规格: 0.2mlIRF4  干扰素调节因子4抗体 规格: 0.2ml

PRAME  黑色素瘤优先表达抗原抗体 规格: 0.2mlLRRN5  富含亮重复神经元5抗体 规格: 0.2ml

HSP105  热休克蛋白105抗体 规格: 0.1mlMouse Anti-Bov IgG/Cy5.5  Cy5.5标记的小鼠抗牛IgG 规格: 0.1ml

Defensin β2/DEFB2/HBD-2  防御素β2抗体 规格: 0.1mlC1orf93  1号染色体开放阅读框93抗体 规格: 0.2ml 

 


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