详情介绍
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称:土壤植酸酶测试盒可见分光光度法
产品规格:50管/24样
检测方法:可见分光光度法
产品货号:BK-01S6922
产品分类:土壤系列
商品介绍:
测定意义: 植酸酶(phytase)是催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸(盐)的一类酶的总称,属磷酸单酯水解酶,它能将食品和饲料中植酸及其盐转化为可供有机体利用的有效磷,降低粪便中的磷含量,减轻对环境的污染,改善营养成分的吸收和利用,因此具有极其广泛的研究和应用价值。 测定原理 植酸酶在一定温度和pH值条件下,水解底物植酸钠生成无机磷与肌醇衍生物,无机磷在酸性环境中与钼酸铵显色剂反应生成蓝色复合物,在700nm处有特征吸收峰,根据700nm处吸光值变化可计算得植酸酶活性。 自备实验用品及仪器 天平、低温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅,甲苯(不允许快递)。 |
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本: 取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行 匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。 【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
| ② 细菌/细胞样本: 先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次); 12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10 4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。 |
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?
对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。
50T 羊伪结核棒状杆菌PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
200 mL 人白细胞分离液1.078 Cell Separation Solution -20℃保存
25mL Laemmli’s (SDS-Sample) Buffer (reducing,4X) Laemmli’s (SDS-Sample) Buffer (reducing,4X) 常温保存
1 mg Quin-2 AM Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
2 ug pLentiCRISPR cas9 v.2 pLentiCRISPR cas9 v.2 低温运输,-20℃保存
HC琼脂基础 HC Agar Base 250g
1瓶 MNNG/HOSCl#5 [R-1059-D]细胞株 MNNG/HOSCl#5 [R-1059-D] 低温运输和保存
A1 A1 Medium 250g
500mg 人血清白蛋白 V Albumin Human Serum, FractionⅤ 4℃保存
100mL Transformation Buffer-1 Transformation Buffer-1 常温保存
100µL 小鼠抗SUMO标签蛋白单抗 Anti SUMO-Tag Mouse MAb -20℃保存
土壤植酸酶测试盒可见分光光度法Phospho-NFKB p65(Ser276) 磷酸化细胞核因子NF-κB p65抗体 规格: 0.1ml
TNF-alpha(1F6) 瘤坏死因子-α单克隆抗体 规格: 0.1ml
ATP citrate lyase/ACLY 三磷酸柠檬酸裂解抗体 规格: 0.2mlPhospho-NPM (Thr199) 磷酸化核仁磷酸蛋白抗体 规格: 0.1ml
phospho-eIF4EBP1/2/3(Thr36) 磷酸化4E结合蛋白1,2,3抗体 规格: 0.1mlphospho-Rb(Ser249) 视网膜母细胞瘤相关蛋白1抗体 规格: 0.1ml
Phospho-FoxO3a (Ser318/321) 磷酸化叉蛋白3A抗体 规格: 0.1mlPhospho-HSL (Ser863) 磷酸化荷尔蒙敏脂肪抗体 规格: 0.1ml
RASL/RASL10A Ras样蛋白家族10A抗体 规格: 0.2mlAdenylosuccinate Lyase 苷酸琥珀酸裂解抗体 规格: 0.2ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗小鼠k链 规格: 0.1mlCDK7 周期素依赖性激7抗体 规格: 0.1ml
SFRP1 分泌型卷曲相关蛋白1抗体 规格: 0.1mlC11orf74 11号染色体开放阅读框74抗体 规格: 0.2ml
phospho-C-Myc(Thr373) 磷酸化致基因C-Myc抗体 规格: 0.2mlIRF4 干扰素调节因子4抗体 规格: 0.2ml
PRAME 黑色素瘤优先表达抗原抗体 规格: 0.2mlLRRN5 富含亮重复神经元5抗体 规格: 0.2ml
HSP105 热休克蛋白105抗体 规格: 0.1mlMouse Anti-Bov IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的小鼠抗牛IgG 规格: 0.1ml
Defensin β2/DEFB2/HBD-2 防御素β2抗体 规格: 0.1mlC1orf93 1号染色体开放阅读框93抗体 规格: 0.2ml