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商品介绍:
测定意义: 植酸酶(phytase)是催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸(盐)的一类酶的总称,属磷酸单酯水解酶,它能将食品和饲料中植酸及其盐转化为可供有机体利用的有效磷,降低粪便中的磷含量,减轻对环境的污染,改善营养成分的吸收和利用,因此具有极其广泛的研究和应用价值。 测定原理 植酸酶在一定温度和pH值条件下,水解底物植酸钠生成无机磷与肌醇衍生物,无机磷在酸性环境中与钼酸铵显色剂反应生成蓝色复合物,在700nm处有特征吸收峰,根据700nm处吸光值变化可计算得植酸酶活性。 自备实验用品及仪器 天平、低温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅,甲苯(不允许快递)。 |
提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
土壤植酸酶测试盒微量法 | 100管/48样 | 微量法 | BK-01S6921 |
实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
操作步骤:
1. 样品的准备:
a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。
b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。
d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。
e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。
2. 试剂盒的准备工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。
b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。
素B(4ug) 1ml/支*5
1瓶 NB-4细胞株 NB-4 低温运输和保存
双料乳糖胆盐发酵 Double Lactose Bile Medium 250g
100g β- β-Amylase 4℃保存
1000mL Tris Buffered Saline(TBS),10X,low salt) Tris Buffered Saline(TBS),10X,low salt) 常温保存
25mg 化的牛血清白蛋白 Biotin-BSA -20℃保存
2 ug pThio-His A pThio-His A 低温运输,-20℃保存
50支 B(尼龙头) Uterus Swabs 常温
2 ug pDsRed2-Express-N1 pDsRed2-Express-N1 低温运输,-20℃保存
D-环溶液 5ml*10
100g 柠檬酸钠,二水 Sodium Citrate Dihydrate 室温保存
土壤植酸酶测试盒微量法AIFM3 凋亡诱导因子3抗体 规格: 0.2ml
HCG/LH/FSH/TSH alpha 人绒毛膜促性激素α亚基抗体(Cg A) 规格: 0.1ml
CCL24 嗜酸粒细胞趋化蛋白24抗体 规格: 0.2ml
Goat Anti-rabbit IgG/FITC FITC标记的羊抗兔IgG 规格: 0.3ml
CK2 细胞角蛋白2抗体 规格: 0.1ml
GLUT8 葡萄糖转运蛋白8抗体 规格: 0.2ml
Phospho-Zyxin (Ser142/Ser143) 磷酸化斑联蛋白抗体 规格: 0.1ml
PFK2/PFKFB3 6磷酸果糖激2抗体 规格: 0.2ml
GABARAPL1 γ氨基丁酸受体相关蛋白样1抗体 规格: 0.2ml
Histone H2B 组蛋白H2B抗体 规格: 0.1ml
HSD11B1/HSD1 羟基类固醇脱11β1抗体 规格: 0.1ml
DRD2 多巴胺受体D2抗体 规格: 0.1ml