PCR实验步骤：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其*溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。

原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。产品仅用于科研
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
产品名称：鹅源性核酸检测试剂盒 PCR-荧光探针法 
产品规格： 48T  0.2PCR管
产品货号：BK-P97209
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。

产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
产品特点：
1. 使用化学修饰的热启动聚合酶，反应特异性高，*程度地避免了非特异扩增；
2. 反应缓冲液经充分优化，反应灵敏快速，40个循环只需20多分钟；
3. 抗干扰能力强，反应重复性高，适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。
在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

特异性荧光标记：
TaqMan法
TaqMan探针的特性：
（1）5′端标记有报告基团（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端标记有荧光淬灭基团 （Quencher, Q）
（3）探针完整，R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ，无荧光， R与Q分开，发荧光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探针
相对定量通过内标定量：
内标（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在细胞中的表达量或在基因组中的拷贝数恒定，受环境因素影响小，内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。

实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括绝对定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
甲氨蝶呤质量规格：>99%,BRMethotrexate  人抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(MCV)ELISA检测试剂盒Humanai-matedciullinatedvimeinaibody,MCVELISAKit 96T/48T  HumancrosslinkedN-telopeptideoftypeⅠcollagen,XELISA试剂盒人Ⅰ型胶原N末端肽(X)ELISA试剂盒规格：96T/48T

甲氨蝶呤（标准品）质量规格：HPLC>99%,标准品Methotrexate  大鼠脑肠肽(BGP/Geh
焦地黄苯乙醇甙B1（标准品）Jionoside B1质量规格：HPLC≥98%,标准品  化线粒体氧化应激活性氧(ROS)鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒50  病毒H5N1亚型(AIV-H5N1)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

N-6022N6022质量规格：>98%,GSNOR抑制剂  RatIerleukin12,IL-12/P40ELISA试剂盒大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA试剂盒规格：96T/48T  HumanparamyxovirusparotitisIgGELISA试剂盒人腮腺炎病毒IgGELISA试剂盒规格：96T/48T

巴柳氮钠（标准品）Balsalazide质量规格：含量测定  小鼠抑制素βB(INHβB)ELISA试剂盒 ，英文名： INHβB ELISA Kit  ELISAKitIgG猪球蛋白G规格：48T/96T

依帕司他（标准品）Epalrestat 质量规格：UV法含量测定  兔子胆酯转移蛋白(CETP)ELISA检测试剂盒Rabbitcholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit 96T/48T  HumanElastin,ELNELISAKit人弹性蛋白(ELN)ELISA试剂盒规格：96T/48T
人心脏微血管内皮细胞裂解物HCMECL3-溴-1,10-邻二氮杂菲(>98.0%(HPLC)(T))质量规格：>98.0%(HPLC)(T)3-Bromo-1,10-phenanthroline

TIMD4 Others Human 人 TIMD4 / TIM4 人细胞裂解液 (阳性对照) 5-氯-1,10-菲咯啉(>98.0%(T))质量规格：>98.0%(T)5-Chloro-1,10-phenanthroline

BHK 叙利亚仓鼠肾细胞2-氯-1,10-邻二氮杂菲(>98.0%(HPLC)(T))质量规格：>98.0%(HPLC)(T)2-Chloro-1,10-phenanthroline

CL-0158MGC80-3(人胃癌细胞)5×106cells/瓶×24,7-二甲基-1,10-邻二氮杂菲(>98.0%(T))质量规格：>98.0%(T)4,7-Dimethyl-1,10-phenanthroline

mCF, 小鼠心脏成纤维细胞3-O-β-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李糖(1→2)]- a-L-阿拉伯糖 常春藤配基- 28-O-鼠李糖(1→4)葡萄糖(1→6)葡萄糖苷质量规格：HPLC≥98%，标准品V
鹅源性核酸检测试剂盒 PCR-荧光探针法IL22RA2 Others Human 人 IL22BP / IL22RA2 人细胞裂解液 (阳性对照) 普通肉汤琼脂培养基25克2～8℃，避光

人低侵袭性脉络膜色素素瘤细胞;OCM-1A腺苷;;;腺速苷;胰苷;腺呤配糖;腺尿环核苷 cdqnosinq 28-61-7

CSF2 Others Human 人 GM-CSF / CSF2 人细胞裂解液 (阳性对照) 双[三(羟甲基)]基... BIS-TRIS (cell culture tested, ≥98%) 6976-37-0 25G 通用试剂

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