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沉淀法miRNA分离试剂盒
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更新时间:2024-01-01  |  阅读:391

详情介绍

产品特点:
高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
产品名称:沉淀法miRNA分离试剂盒 
产品规格: 详见说明
产品货号:BK-P96572
储存条件:-20避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。

原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0E1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。产品仅用于科研
特异性强
PCR
反应的特异性决定因素为:
引物与模板DNA特异正确的结合;
碱基配对原则;
Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
靶基因的特异性与保守性。

产品特点:
1.
使用化学修饰的热启动聚合酶,反应特异性高,*程度地避免了非特异扩增;
2.
反应缓冲液经充分优化,反应灵敏快速,40个循环只需20多分钟;
3.
抗干扰能力强,反应重复性高,适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。
PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
特异性荧光标记:
TaqMan

TaqMan
探针的特性:
15′端标记有报告基团(Reporter, R),如FAMVIC
23′端标记有荧光淬灭基团 Quencher, Q
3)探针完整,R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ,无荧光, RQ分开,发荧光
4Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探针
相对定量通过内标定量:
内标(Endogenous Control)通常是β-actinGAPDH基因等看家基因,在细胞中的表达量或在基因组中的拷贝数恒定,受环境因素影响小,内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。

实验注意事项:
1
RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2
)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3
)客户尽量不要提供DNARNA样品。
4
)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNARNA样品进行定量(包括绝对定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNARNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
PCR实验步骤:
取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其*溶解。
两相分离 1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2mllvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,1530孵育23分钟。412000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%
RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后1530孵育10分钟后,于412000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,47000rpm离心5分钟。
RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其*溶解,获得的RNA溶液保存于-80待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
1863-63-4本铵;安息香酸铵AMMoniuM benzoate  S100钙结合蛋白A9/钙粒蛋白B(S100A9)免疫试剂盒 human S100A9 ELISA Kit
香草醛(熔点标准品) Vanillin质量规格:熔点测定  17羟孕酮(17-OHP)试剂盒 Canine 17-Hydroxyprogesterone,17-OHP ELISA Kit  人尿苷二1酸葡萄糖酸转移酶1(UGT1) ELISA 剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

环吡酮;环匹罗司Ciclopirox质量规格:>99%,BR  英文名称HumanCoisolELISAKit人皮质醇(Coisol)ELISAKit规格:96T/48T  小鼠维生素B12(VB12)试剂盒 Mouse Vitamin B12,VB12 ELISA Kit

环吡酮;环匹罗司(标准品)Ciclopirox质量规格:HPLC>99%,标准品  蛋白酶抑制剂混合液保留细胞内成分活性A、动物细胞B、细菌C、酵母菌D、植物  猩红热链球菌(ST)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

十二水合硫酸铁铵(>98%,BR)Ammonium iron(II) sulfate, hexahydrate质量规格:>98%,BR  RatMetallothionein,MTELISA试剂盒大鼠金属硫蛋白(MT)ELISA试剂盒规格:96T/48T  humansnailhomolog2,SNAI2ELISA试剂盒人蜗牛同源物2(SNAI2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
漆黄素(标准品)Fisetin质量规格:HPLC98%,标准品  小鼠纤维连接蛋白(FN)ELISA试剂盒 ,英文名: FN ELISA Kit  ELISAKitAQP-5小鼠水通道蛋白5规格:48T/96T

奇任醇(标准品)Kirenol质量规格:HPLC98%,标准品  牛乙酰乙酸检测(ACAC)ELISA检测试剂盒BovineAcetoaceticacid,ACACELISAKit 96T/48T  Humanbasicfibroblastgrowthfactor6,bFGF-6ELISAKit人碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)ELISA试剂盒规格:96T/48T

千层纸素A(标准品)Oroxylin A质量规格:HPLC98%,标准品  8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)试剂盒 Human 8-Hydroxydeoxyguanosine,8-OHdG ELISA kit  人球蛋白轻链kappa抗体(κ-IgLC)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

千金子二萜醇二乙酰甲酰酯(标准品)5,15-Diacetyl-3-benzoyllathyrol质量规格:HPLC98%,标准品  英文名称MouseIerleukin-17IL-17ELISAKIT小鼠白介素-17(IL-17)规格:96T/48T  小鼠髓1脂碱性蛋白(MBP)试剂盒 Mouse myelin basic protein,MBP ELISA Kit
沉淀法miRNA分离试剂盒7235-40-7β-胡萝卜素~1600U/MG(-20)beta-Carotene  冰冻切片半胱氨酸蛋白酶12(CASPASE-12)活性原位荧光染色检测试剂盒50


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