注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

产品名称： 柱式动物DNA提取试剂盒
规格： 50次
货号：BK-P96321
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。

特点优势：
   1.   特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
   2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
   3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
   4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除TIANDZ公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
   6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
使用方法：
一、样品采集：
1、食品样品：样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品：用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL，注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管，立即混匀。
3、粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液（最好用带芯枪头，下同）。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

荧光定量PCR实验步骤：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其*溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。

人真核细胞延伸因子2(eEF2)ELISA Kit    Human elongation factor 2,eEF2 ELISA Kit

人真核起始因子4A-II(EIF4A2/DDX2B/EIF4F)ELISA Kit    Human Eukaryotic initiation factor 4A-II(EIF4A2/DDX2B/EIF4F)ELISA kit

人张力蛋白4(TNS4)ELISA Kit    Human TNS4 ELISA Kit

人粘蛋白3(MUC3)ELISA Kit    Human Mucin3,MUC3 ELISA Kit

人粘蛋白2(MUC2)ELISA Kit    Human Mucin 2,MUC2 ELISA Kit

人增殖诱导配体(APRIL)ELISA Kit    Human a proliferation inducing ligand,APRIL ELISA Kit

人早期生长反应因子1(EGR1)ELISA Kit    Human EGR1 ELISA Kit

人早期前列腺癌抗原2(EPCA2)ELISA Kit    Human early prostate cancer antigen 2,EPCA2 ELISA kit

人早期活化抗原CD69(CD69)ELISA Kit    Human CD69 ELISA kit

人早老素2(PS-2)ELISA Kit    Human Presenilin 2,PS-2 ELISA Kit

人早老素1(PS-1)ELISA Kit    Human Presenilin 1,PS-1 ELISA Kit

人再生胰岛衍生1α/胰石蛋白/胰线蛋白(REG1A)ELISA Kit    Human REG1A ELISA Kit

人载脂蛋白L1(APOL1)ELISA Kit    Human APOL1 ELISA kit

人载脂蛋白H(Apo-H)ELISA Kit    Human Apo-H ELISA Kit

人载脂蛋白C3(Apo-C3)ELISA Kit    Human Apo-C3 ELISA Kit

人载脂蛋白C2(Apo-C2)ELISA Kit    Human Apo-C2 ELISA Kit

人载脂蛋白C1(APO-C1)ELISA Kit    Human Apolipoprotein C-I,APOC1 ELISA kit

人载脂蛋白B48(apo-B48)ELISA Kit    Human Apolipoprotein B48,apo-B48 ELISA Kit

人载脂蛋白A5(apo-A5)ELISA Kit    Human apo-A5 ELISA Kit

人载脂蛋白A4(Apo-A4)ELISA Kit    Human Apo-A4 ELISA Kit

人载脂蛋白A2(apo-A2)ELISA Kit    Human Apolipoprotein A2,apo-A2 ELISA Kit

人载脂蛋白A1(Apo-A1)抗体 ELISA Kit    Human anti-apolipoprotein A1(Apo-A1)antibody ELISA Kit

人运甲状腺素蛋白/前白蛋白(TTR)ELISA Kit    Human TTR ELISA Kit

人孕烯醇酮(PREG)ELISA Kit    Human pregnenolone,PREG ELISA kit

人孕酮受体(PGR)ELISA Kit    Human PGR ELISA Kit

Bolton肉汤基础     250g     用于空肠弯曲菌的选择性增菌(GB)，每100mL基础培养基需添加1支配套试剂(SR0340)

哥伦比亚琼脂培养基     250g     灭菌后冷至45℃左右时加入5%脱纤维羊血，用于空肠弯曲菌的培养。(CP、GB、EP、USP)

高氏合成1号琼脂培养基     250g     供放线菌培养用。

血平板 (成品培养基)     20个/盒     用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验

哥伦比亚血平板(成品培养基)     20个/盒     用于一般病原菌的分离培养和溶血性细菌的鉴别

改良克氏双糖培养基     250g     用于小肠结肠炎耶尔森氏菌的鉴定

硝酸盐蛋白胨水培养基     250g     用于鉴别绿脓杆菌分解硝酸盐产气试验

半固体琼脂     250g     供细菌动力观察、菌种保存，H抗原位相变异试验等。(美国FDA、SN、GB)

3%氯化钠三糖铁琼脂     250g     用于副溶血性弧菌的生化反应。(GB、SN)

血琼脂培养基基础     250g     加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验

苯丙氨酸培养基     100g     用于鉴别细菌利用铵盐作为氮源并分解葡萄糖的试验。

葡萄糖铵培养基     100g     用于鉴别细菌利用铵盐作为氮源并分解葡萄糖的试验。

尿素琼脂培养基基础     250g     用于鉴别肠道菌尿素酶试验

缓冲动力-硝酸盐培养基     250g     供产气荚膜梭菌动力和硝酸盐还原测定用

动力—硝酸盐培养基(A法)     250g     供鉴别测定细菌液化明胶用

明胶培养基(营养明胶)     100g     供测定细菌液化明胶使用

克氏双糖铁琼脂     250g     用于鉴别肠道菌发酵葡萄糖和乳糖，及产生硫化氢的生化反应。(ISO)

缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR-VP培养基、磷酸盐葡萄糖胨水培养基)     250g     用于MR和VP试验

Koser氏枸椽酸盐肉汤     100g     用于细菌的枸橼酸盐的试验

西蒙氏柠檬酸盐培养基     100g     用于肠道菌的柠檬酸盐利用试验

蛋白胨水 (靛基质培养基)     100g     供鉴别细菌能否产生靛基质的生化反应

糖发酵培养基基础     250g     加入各种糖类，供鉴别各种需氧菌对糖类的发酵反应用

氨基酸脱羧酶试验基础培养基     250g     供鉴别肠道菌属能否产生氨基酸脱羧酶用

三糖铁琼脂培养基(TSI)药典     250g     用于鉴别肠道菌发酵蔗糖、乳糖、葡萄糖及产生硫化氢的生化反应（《中华人民共和国药典》2010年版...

柱式动物DNA提取试剂盒三糖铁琼脂(TSI)     250g     用于鉴别肠道菌发酵蔗糖、乳糖、葡萄糖及产生硫化氢的生化反应

葡萄糖铵培养基     100g     用于鉴别细菌利用铵盐作为氮源并分解葡萄糖的试验(GB/T4789.28－2003 中3.8，GB/T4789.5－20...

尿素琼脂培养基基础     250g     用于鉴别肠道菌尿素酶试验 (GB4789.4－2010，《中华人民共和国药典》2010年版，SN0170-92和GB130...

缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR-VP培养基、磷酸盐葡萄糖胨水培养基)     250g     用于MR和VP试验