细胞培养操作规程，供参考
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备F-12K培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二． 细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

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公司细胞现货供应，质量有保证、*、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。公司产品仅用于科研，不得用于临床．

注意事项：
1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2.收到细胞先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时（视细胞密度而定）稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收细胞时就整体外观拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，随后在显微镜下拍下细胞状态，100*，200*各一张），观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。
3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响，故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态，故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明，期间间隔时间不能大于7天。
4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
腺苷酸环化酶9抗体

细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

小鼠树突状细胞肉瘤细胞;DCS铝钾1克

AGT Others Human 人 AGT / SerpinA8 人细胞裂解液 (阳性对照) 2，4-二基-6-叔丁基本酚 2-(tqrt-Butyl)-4,6-dimqthylphqnol 1879-09-0

KM小鼠子瘤株;U27代本1公斤

IL1R2 Others Canine 狗 IL1R2 / IL1RB 人细胞裂解液 (阳性对照) 录化钠蔗糖琼脂shēng huà shì jì容量：100毫升

CaEs-17, 人食管癌细胞株107-93-7;β-甲基酸;亚乙基乙酸;2-酸(反式);1-羧基;α-酸Crotoni acid;α-Crotoni acid;β-metxylacrylic acid;Solid crotoni acid;1-Carboxypropylene;α-Butenic acid
PTH1R Others Human 人 PTH1R / PTHR1 / PTH1 Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 酮麝香(标准品)Musk ketone质量规格：HPLC≥98%,标准品

NCI-H1650 人非小细胞肺癌细胞苯甲酰基十字孢碱(PKC-412)Midostaurin质量规格：≥96%,美国进口

SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌细胞无水邻菲啰啉；1,10-菲罗啉1,10 –Phenanthroline anhydrous质量规格：AR,>99%

THPO Protein Human 重组人 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 标签)邻菲啰啉一水；1,10-菲罗啉一水1,10-Phenanthroline hydrate质量规格：AR,>99%

人浸润性导管癌旁皮肤细胞;CCD-1095Sk 人成纤维细胞*培养基 100mL邻菲啰啉盐酸盐一水；1,10-菲罗啉盐酸盐1,10-Phenanthroline   monohydrate质量规格：AR,>99%
人鼻咽癌细胞(低分化)FCAR Others Rat 大鼠 FCAR / CD89 人细胞裂解液 (阳性对照) 4,5-二氯邻苯二甲腈(>98.0%(GC)(N))4,5-Dichlorophthalonitrile质量规格：>98.0%(GC)(N)

GHS1 金黄地鼠皮肤成纤维细胞4-十二烷氧基邻苯二甲腈(>99.0%(GC))4-Dodecyloxyphthalonitrile质量规格：>99.0%(GC)

CM-M022小鼠甲状腺上皮细胞*培养基100mL4-叔丁基杯[4]芳烃(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylcalix[4]arene质量规格：>98.0%(HPLC)

LX-2, 人肝星形细胞株4-叔丁基杯[5]芳烃(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylcalix[5]arene质量规格：>98.0%(HPLC)

EB病毒转化的人B细胞;KMY0906 人内脏脂肪细胞*培养基 100mL杯[8]芳烃(>90.0%(HPLC))Calix[8]arene质量规格：>90.0%(HPLC)
细胞接受后的处理：
1） 收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
2） 请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3） 弃去T25瓶中的培养基，添加6ml新的的*培养基。
4） 如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代。
5） 接到细胞次日，请检查细胞是否污染，

上）请及时进行细胞传代。
5） 接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。

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细胞培养操作规程，供参考
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备F-12K培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二． 细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
注意事项：
1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2.收到细胞先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时（视细胞密度而定）稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收细胞时就整体外观拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，随后在显微镜下拍下细胞状态，100*，200*各一张），观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。
3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响，故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态，故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明，期间间隔时间不能大于7天。
4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
腺苷酸环化酶9抗体

细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
AIMP1 Protein Mouse 重组小鼠 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白本甲酰三扶shēng huà shì jì容量：RT1克

小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)(5×105) U266B1 [U266], 人多发性骨髓瘤细胞 Human井冈霉素 Validamycin 37248-47-8 5G 通用试剂

大鼠背脊髓神经元RN-dsc轻拂醋;拂轻醋 xy7nofluoric ccid

CD1B & B2M Others Human 人 CD1B & B2M Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) Tyrosinedecarboxylase酪酸脱羧酶25克BR，2500～7000u/mg，猪血

猕猴肌肉细胞;MMm7109-72-8丁基n-Butyllitxium
BPIFA2 Others Human 人 BPIFA2 / C20orf70 人细胞裂解液 (阳性对照) 物质P（1-9）Substance P (1-9)质量规格：>95%,BR

人食管上皮细胞*培养基 100mL物质P（7-11）Substance P (7-11)质量规格：>95%,BR

7WML6.0细胞，人APP-PS1(M146L)双基因转染CHO细胞株 生孢梭菌 狗肺成纤维样细胞;DogL1TA-0910，他替瑞林TA-0910, taltirelin质量规格：>95%,BR

PPBP Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 标签)促甲状腺激素释放激素，游离酸TRH, Free Acid质量规格：>95%,BR

NRK-52E(大鼠肾小管导管上皮细胞) 5×106cells/瓶×2 人 APCDD1 人细胞裂解液 (阳性对照) 尿皮质激素Ⅲ，小鼠Urocortin III, mouse质量规格：>95%,BR
人B淋巴母细胞IGSF3 Others Human 人 IGSF3 / EWI-3 人细胞裂解液 (阳性对照) 25-脱乙酰基利福平25-Desacetyl Rifampicin质量规格：美国进口

NCI-H1395 人肺腺癌细胞L-缬氨酰胺盐酸盐L-Valinamide  质量规格：>98%,BR

Raw264.7, 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞半胱胺盐酸盐Cysteamine 质量规格：>99%,BR

LGALS1 Protein Human 重组人 Galectin-1 / LGALS1 蛋白甘氨酰胺盐酸盐Glycinamide 质量规格：0.98

人肝细胞;QSG-7701 [QSG7701] 人呼吸道上皮细胞*培养基 100mLL-羟脯氨酸甲酯盐酸盐L-4-Hydroxyproline methyl ester 质量规格：>98%,BR
公司细胞现货供应，质量有保证、*、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。公司产品仅用于科研，不得用于临床