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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
食管上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)茶苯海明（标准品）质量规格：HPLC法含量测定Dimenhydrinate

DYRK3 Others Human 人 DYRK3 / REDK 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸泼尼龙（标准品）质量规格：含量测定Prednisolone acetate

tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);F9-CAG-tTA-4D6醋酸曲安奈德（标准品）质量规格：含量测定xx

COLO 205细胞，结肠癌细胞 正常人肝细胞,L-02细胞 CL-0056CCD-1095Sk(人浸润性导管癌旁皮肤细胞)5×106cells/瓶×2达那唑（标准品）质量规格：含量测定Danazol

人APP基因转染CHO细胞株;7WD10安息香(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)Benzoin Methyl Ether
hMNC-PB single donor Pellet 人类外周血单核细胞团块单一捐献者，超 > 1 mio.cells 人羊膜上皮细胞总RNAHAmEpiC NA3-羟基-(3β)-乌索12-1-28-酸，英文名或英文缩写：Ursolic acid，级别：BR，85%，规格：5克

CM-M042小鼠直肠平滑肌细胞*培养基100mL2,3-二 2,3-Dihydroxybenzoic acid,99% 303-38-8 5G 通用试剂

HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 录化镧水合物 LcNTHcNUM CHLORIDq HYDRcTq 011-76-1

间充质干细胞软骨细胞分化培养基MCDM尿激酶shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光1克

水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S3 细胞，Hela细胞 HEL299(红白细胞白血病细胞)124594-15-6基磺酸镍NICKEL(II) SULFAMATE TETRAHYDRATE
CM-R078大鼠大隐静脉平滑肌细胞*培养基100mL罗汉果皂苷Ⅲemogroside III e质量规格：HPLC≥98%，标准品

Ishikawa, 人内膜癌细胞系 胚肺细胞,2BS细胞 SNU-398(人肝癌细胞)罗汉果黄素Grosvenorine质量规格：HPLC≥98%，标准品

C3H/An小鼠结缔组织细胞(L929-TK-);LTK-白皮杉醇,3'-羟基白藜芦醇;比杉特醇(标准品)Piceatannol质量规格：HPLC≥95%，标准品

TNFRSF19 Others Mouse 小鼠 TNFRSF19 / OY 人细胞裂解液 (阳性对照) 化镁Magnesium chloride质量规格：工业级

人小细胞肺癌;NCI-H2227苜蓿素(标准品)Tricin质量规格：HPLC≥98%，标准品
石英比色皿751、721、722等CM-H083人脐动脉内皮细胞*培养基100mL胆碱非诺贝特Choline Fenofibrate质量规格：美国进口

Hepa 1-6, 小鼠肝癌细胞丙磺舒酰基β-D-葡萄糖苷酸Probenecid Acyl β-D-Glucuronide质量规格：美国进口

人癌细胞;MDA-MB-453 人角膜成纤维细胞*培养基 100mL诺氟沙星-d5Norfloxacin-d5质量规格：美国进口

人口腔角质细胞cDNAHOK cDNA4-含氧诺氟沙星4-Oxo Norfloxacin质量规格：美国进口

CCL17 Others Mouse 小鼠 CCL17 / TARC 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) N-羟基诺氟沙星N-Hydroxy Norfloxacin质量规格：美国进口
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。