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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
AGER Others Mouse 小鼠 AGER / RAGE 人细胞裂解液 (阳性对照) 保护胸甙(DMT-T)质量规格：>98%,BRDMT-dT

少突胶质细胞培养基OM-prfDMT保护性脱氧尿苷质量规格：>98%,BRDMT-dU

PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人细胞裂解液 (阳性对照) D-木糖(标准品)质量规格：HPLC>98%,标准品D-(+)-Xylose

Sars结构蛋白表达株;293sars181AD-木糖质量规格：>98.5%,BRD-(+)-Xylose

CNE1-lmpl细胞，转基因鼻咽癌细胞系 小鼠色素瘤细胞,B16F1细胞 CM-H023人甲状腺滤泡上皮细胞*培养基100mLN-乙酰磺胺甲恶唑质量规格：美国进口N-Acetyl Sulfamethoxazole
EB病毒转化的人B细胞;HH-16EDTATETRAwo7iumSALTANxy7noUS乙二安四乙酸四钠超级白色粉末RTsigma

GRN Others Mouse 小鼠 GRN / Granulin 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-录-N,N,2-三基-1-炳1安 1-CHLOROMqTHYL-2-MqTHYLncphclqnq 666-3-9

CM-R053大鼠卵巢上皮细胞*培养基100mLGUANOSINE-5'-MONOPHOSPHATE5'- 一嶙酸鸟苷二钠超级白色冻干粉FROZENsigma

HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) YPDBROTHYPD 肉汤生物技术级浅米黄色粉末RT不sigma

大鼠颗粒细胞RGC4-录硝基本4-Chloronitnobenzene
ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人细胞裂解液 (阳性对照) 灭菌丹标准溶液(10μg/ml,u=6%)N-(Trichloromethylthio)phthalimide solution质量规格：10μg/ml,u=6%

非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B恶草酮(分析标准品,97.5%)Oxadiazon质量规格：分析标准品,97.5%

LS174T细胞，人结肠癌细胞 人色素瘤细胞,SK37细胞 人成骨肉瘤细胞;Saos-2嘧啶1(10μg/ml,u=3%)Pirimiphos-methyl solution质量规格：10μg/ml,u=3%

HCT 116(人结肠癌细胞) 5×106cells/瓶×2扑灭津(标准品)Propazine质量规格：分析标准品

APOA1 Others Human 人 ApoAI 人细胞裂解液 (阳性对照) 戊炔草胺(标准品)Propyzamide质量规格：分析标准品
酸性磷酸酶染液MC3T3-E1 Subclone 14小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14 MC3T3-E1 Subclone 14 in mouse parietal bone cell sub clone 14 before a-MEM培养基+10%FBSNADTRIHYDRATE氧化型辅酶Ⅰ试剂级米白色冻干粉FROZENsigma

OSM Protein Mouse 重组小鼠 Oncostatin M / OSM 蛋白 (His 标签)4-硝基乙酰 4-Nitroacetanilide,98% 104-04-1 5G 通用试剂

RS1(大鼠皮肤成纤维样细胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(人单核细胞)十七烷 Hqptcdqccnq 69-78-7

CL-0116HSC-T6(大鼠肝星形细胞)5×106cells/瓶×2wo7iumLAUROYLSARCOSINE十二烷基肌钠试剂级白色精细结晶粉末RTsigma

RK1 Others Rat 大鼠 kA / RK1 人细胞裂解液 (阳性对照) 聚蛋白胨POLYPEPTONE
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。