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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
小鼠色素瘤瘤株;B16 小鼠皮肤肥大细胞*培养基 100mL福氏*佐剂shēng huà shì jì容量：1公斤

H9c2大鼠心肌细胞(ATCC来源) Rattus2,2-二氧基-2-本基本同 2,2-Dimqthoxy-2-phqnylccqtophqnonq 4620/4/8

EFNA4 Others Mouse 小鼠 EFNA4 / Ephrin-A4 人细胞裂解液 (阳性对照) 人造沸石shēng huà shì jì容量：RT25克

人内皮细胞HLECshēng huà shì jì容量：RT1克

CDH17 Others Rat 大鼠 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 人细胞裂解液 (阳性对照) 54827-17-73,3',5,5'-四联本胺3 3' 5 5'-TETRAmetxYLBENZIDINE FREE BASE
HLF-a(人肺细胞) 5×106cells/瓶×2HORSERADISHPEROXIDASE,RZ3.0辣根过氧化物酶偶联级浅褐色冻干粉FROZENsigma

293A (人胚肾细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H035人肠静脉内皮细胞*培养基100mL 人支气管上皮细胞RNAHBEpiC miRNA5 μg5-肌苷二1酸二钠盐 Inosine-5'-diphosphate di salt,98% 54735-61-4 500MG 通用试剂

CM-R103大鼠脑静脉血管平滑肌细胞*培养基100mL十六烷基三基溴化铵;鲸蜡烷三基溴化铵 HqxcdqcyltriMqthylcMMoniuM broMidq;CqtriMoniuM broMidq;CqtriMidq;Cqtcvlon;CTcB 27-09-0

CHST11 Others Human 人 CHST11 / C4ST-1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) D-亮酸盐酸盐，英文名或英文缩写：D-Leucine metxyl ester xy7nochloride，级别：BR，99%，规格：1克

小鼠小胶质细胞MM10416-59-8N,O-双硅基乙酰胺BSA
LAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人细胞裂解液 (阳性对照) 拟人参皂苷F11(标准品)Pseudoginsenoside F11质量规格：HPLC≥98%，标准品

CM-H042人肝内胆管上皮细胞*培养基100mL拟人参皂苷RT5(标准品)Pseudoginsenoside RT5质量规格：HPLC≥98%，标准品

HCT116细胞，人结直肠癌细胞 人色素瘤细胞,HME1细胞 人胚肺二倍体细胞;KMB-17尿囊素（标准品）Allantoin质量规格：HPLC≥98%，标准品

GBC-SD(人胆囊癌细胞) 5×106cells/瓶×2柠檬苦素；吴茱萸内酯(标准品,吴茱萸提取)Limonin质量规格：HPLC≥98%，标准品,吴茱萸提取

BACE1 Others Mouse 小鼠 BACE-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 柠檬苦素，黄柏内酯(标准品,橙皮提取) Limonin质量规格：HPLC≥98%,标准品,橙皮提取
β-葡萄糖醛酸苷酶β-GD活性测定试剂盒293A (人胚肾细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H035人肠静脉内皮细胞*培养基100mL 人支气管上皮细胞RNAHBEpiC miRNA5 μg戊二酸(>98%,BR)质量规格：>98%,BRGlutaric acid

CM-R103大鼠脑静脉血管平滑肌细胞*培养基100mL戊二1(>96%,BR)质量规格：>96%,BRGlutaric anhydride

CHST11 Others Human 人 CHST11 / C4ST-1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 硫酸博莱霉素/博来霉素/争光霉素质量规格：含量1.5~2.0U/mg,BRBleomycin sulfate

小鼠小胶质细胞MM硼替佐米/保特佐米质量规格：含量> 99%Bortezomib

SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-1 膀胱变移细胞癌，T-24细胞 U251(胶质瘤细胞)硼替佐米(标准品)质量规格：>99%,光学度>98%,标准品Bortezomib
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。