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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
人脂肪细胞-内脏(HPA-v)(1×106 ) MDA-MB-231(ATCC来源), 人癌细胞 HumanPUC19质粒1克RT

人急性母细胞性白血病细胞;MOLT-41-炔基环己1 99% 1-qTHYNYLCYCLOHqXqNq 931-49-7

FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 马血清25克

CM-H110人皮肤肥大细胞*培养基100mLPEROXIDASE,HORSERADISH,RZ1.0辣根过氧化物酶试剂级红褐色至褐色粉末FROZENsigma

5-8F, 人高转移鼻咽癌细胞系 瘤,EL4IL-2细胞 PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤)144432-85-93-录-4-扶本硼酸3-Chloro-4-fluoropxenylboronic acid
人脐带动脉内皮细胞 (HUAEC)( 5×105 )碳酸锰25克

CM-H088人腹膜内皮细胞*培养基100mL-5-羟色胺肌酐 Serotonin creatinine sulfate salt mono... 61-47-2 100MG 通用试剂

BALB/C小鼠肝上皮细胞;BNL 1ME A.7R.1 小鼠小肠粘膜上皮细胞*培养基 100mL三拂磺醋亚铁 IRON(II) TRIFLUOROMqTHcNqSULFONcTq 29163-91-6

RSC, 大鼠雪旺细胞 Rattus镉1克

EPHB4 Others Mouse 小鼠 EPHB4 / HTK 人细胞裂解液 (阳性对照) 测序分离胶NA
LLC-MK2(恒河猴肾细胞) 5×106cells/瓶×2匹伐他汀钙Pitavastatin Calcium /NK-104质量规格：≥98.0% 相关物质及对应异构体均小于1%

Promocell Drosophila Schneider's Drosophila Medium果蝇培养基，无L-谷氨酰胺 500ml匹伐他汀钙(标准品)Pitavastatin Calcium /NK-104质量规格：HPLC≥98.0% ,标准品

人主动脉平滑肌细胞总RNAHASMC NA化钾Potassium iodide质量规格：>99%,AR

CFD Others Mouse 小鼠 CFD / Adipsin 人细胞裂解液 (阳性对照) 吡喹酮Praziquantel质量规格：>98.5%,BR

NCI-H460 人肺癌细胞吡喹酮（标准品）Praziquantel质量规格：HPLC>98%,标准品
α-羟丁酸脱氢酶HBDH活性测定试剂盒CM-H088人腹膜内皮细胞*培养基100mL植酸钠质量规格：>98%,BRPhytic acid dodeca salt hydrate

BALB/C小鼠肝上皮细胞;BNL 1ME A.7R.1 小鼠小肠粘膜上皮细胞*培养基 100mL菊粉;菊糖质量规格：>90%,BRInulin from chicory

RSC, 大鼠雪旺细胞 Rattus固深红 GBC质量规格：BS,90%Fast Garnet GBC Salt

EPHB4 Others Mouse 小鼠 EPHB4 / HTK 人细胞裂解液 (阳性对照) 固红 3 GL质量规格：BSFast Red 3 GL Salt

EB病毒转化的人B细胞;HH-29固红 KL盐质量规格：BSFast Red KL Salt
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。