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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
正常大鼠肾细胞;NRK-52ED-泛醇5克2～8℃

CD70 Others Human 人 CD70 / CD27L / TNFSF7 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙酸盐酸盐 3-Pyridylacetic acid ,98% 6419-36-9 1G 通用试剂

人肝永生化细胞;THLE-3L-精安醋言醋盐;L-言醋蛋柏安基醋;L-言醋胍基务安醋;言醋L-精安醋 L-crgininq xy7nochloridq;L-GucnidinqcMinovclqric ccid xy7nochloridq 1119-34-

大鼠脑膜细胞(RMC)(5×105)邻本二酚紫50毫克保存：-20℃

CM-H048人胃粘膜上皮细胞*培养基100mL7681-52-91 ;录酸钠wo7ium hypochlorite
DLL4 Others Human 人 DLL4 人细胞裂解液 (阳性对照) 氧化铈25克

EB病毒转化的人B细胞;KMY0908三录叔丁醇 Chlorobutcnol 2027/12/8

CD47 Others Rat 大鼠 CD47 人细胞裂解液 (阳性对照) 四乙酸二钠 (... EDTA di (SigmaGrade, for cell cu... 6381-92-6 100G 通用试剂

人卵巢成纤维细胞*培养基 100mLPROTEINASSAYBRADFORDmetxODBRADFORD法蛋白检测试剂盒生物技术级1 KitCOLD

P3-X63-Ag8.653细胞，小鼠骨髓瘤细胞 Ana-1(巨噬细胞) 人正常上皮细胞;MCF 10A7524-52-9L-色酸盐酸盐metxyl L-tryptophanate xy7nochloride
大鼠肺动脉成纤维细胞*培养基 100mL羟基积雪草酸（标准品）Madecassic acid质量规格：HPLC≥98%，标准品

ROS1728 大鼠成骨细胞 Osteoblasts of ROS1728 rats EMEM +10 FBS羟基积雪草酸Madecassic acid质量规格：HPLC≥80%,BR

BTC Protein Human 重组人 BTC / Betacellulin 蛋白 (Fc 标签)海柯皂苷元Hecogenin质量规格：HPLC≥95%，标准品

MV3(人色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)灵芝酸 BGanoderic acid B质量规格：HPLC≥98%，标准品

上皮细胞培养基EpiCM-prf异夏佛塔苷Isoschaftoside质量规格：HPLC≥98%，标准品
谷氨酸Glu含量测定试剂盒EB病毒转化的人B细胞;KMY0908盐酸尼卡地平质量规格：>97%,BRNicardipine

CD47 Others Rat 大鼠 CD47 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸尼卡地平（标准品）质量规格：含量测定Nicardipine

人卵巢成纤维细胞*培养基 100mL克霉唑质量规格：>97%,BRClotrimazole

P3-X63-Ag8.653细胞，小鼠骨髓瘤细胞 Ana-1(巨噬细胞) 人正常上皮细胞;MCF 10A克霉唑(标准品)质量规格：HPLC>97%,标准品Clotrimazole

CCL21 Protein Human 重组人 CCL21 / 6Ckine 蛋白秋水仙碱质量规格：> 98.5%,BR,可用于细胞培养Colchlcine
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。