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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
大鼠骨肉瘤细胞;UMR-106D-AlanineD-2-基5克BR，99%

CDH4 Others Human 人 R-Cadherin / CDH4 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-硼醋 2-Thiophqnqboronic ccid 6162-68-0

人扁桃体上皮细胞HTEpiCCobalt(II,III)oxide氧化钴100克CP

HA Others H5N9 甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) wo7iumxy7noXIDEBEADS,珠子试剂级小直径白色珠子RT不sigma

雪羊皮肤细胞;SSHS1(Earle’s平衡盐)
A673细胞，横纹肌瘤细胞 人非小细胞肺癌细胞,NCI-H838细胞 CL-0460U14-GFP(小鼠子细胞)5×106cells/瓶×2日落黄FCF，英文名或英文缩写：Sunset Yellow FCF，级别：FMP，75%，规格：100克

中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K12-氧代-1-基炳晴 2-OXO-1-PYRROLIDINqPROPIOnitnILq 7663-76-2

FGFR2 Others Human 人 FGFR2 人细胞裂解液 (阳性对照) N-苄氧羰基-L-谷酰，英文名或英文缩写：Z-Gln-OH，级别：BR，98%，规格：100克

MN-h, 小鼠海马神经元3-[(3-胆基)二基]-2-羟基-1-磺酸内盐，英文名或英文缩写：CHAPSO，级别：ACS，规格：25克

TNFRSF1A Others Rat 大鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 人细胞裂解液 (阳性对照) 82-22-41，1-二醌亚胺1,1'-DIANTHRIMIDE
胎牛血清FBS酸洗石棉Asbestos acid washed质量规格：AR

PLXDC1 Others Human 人 PLXDC1 / TEM3 / TEM7 人细胞裂解液 (阳性对照) 苊（标准品）Acenaphthene质量规格：分析标准品,≥99.5%(GC)

CHO 中国仓鼠卵巢细胞铝标准溶液（1000μg/ml,介质:1.0 mol/L HNO3）Aluminum solution质量规格：1000μg/ml,介质:1.0 mol/L HNO3

CL-0038BRL(大鼠肝细胞)5×106cells/瓶×2铝标准溶液（100µg/mL,基体:5%HCl）Aluminum solution质量规格：100µg/mL,基体:5%HCl

CHO, 中国仓鼠卵巢细胞系(+/-)-儿茶精（标准品）(±)-Catechin hydrate质量规格：分析标准品
白蛋白ALB含量测定试剂盒中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1碱式碳酸铋质量规格：BRBismuth(III) subcarbonate basic

FGFR2 Others Human 人 FGFR2 人细胞裂解液 (阳性对照) 水杨酸铋质量规格：铋含量：>56%,BRBismuth(III) subsalicylate

MN-h, 小鼠海马神经元标准溶液(100µg/mL,,基体:1%HNO3)质量规格：100µg/mL,,基体:1%HNO3Lead standard

TNFRSF1A Others Rat 大鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 人细胞裂解液 (阳性对照) 镥标准溶液(1000μg/ml in 10%HCl)质量规格：1000μg/ml in 10%HClLutetium standard

人胚肾二倍体细胞;CCC-HEK-1钼标准溶液(1000μg/ml)质量规格：1000μg/mlMolybdenum standard
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。