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过氧化氢(H2O2)测试盒可见分光光度法
参考价:

型号:

更新时间:2023-12-28  |  阅读:508

详情介绍

商品介绍:

测定意义:

H2O2是生物体内最常见的活性氧分子,主要由SODXOD等催化产生,由CATPOD等催化降解。H2O2不仅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互转化的枢纽。一方面,H2O2可以直接或间接地氧化细胞内核酸,蛋白质等生物大分子,并使细胞膜遭受损害,从而加速细胞的衰老和解体;另一方面H2O2也是许多氧化应急反应中的关键调节因子。

测定原理:

H2O2与硫酸钛生成黄色的过氧化钛复合物,在415nm有特征吸收。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、丙酮60mL、浓盐酸10mL、研钵和冰。

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

过氧化氢(H2O2)测试盒可见分光光度法

50管/48样

可见分光光度法

BK-01S6409

11.png 

实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

MLCB寒天培地 MLCB Agar 250g

1g 姬姆色素染料 Giemsa Stain 室温保存

50T 01和0139CR检测试剂盒   低温运输,-20℃保存

300µL 山羊抗小鼠IgG(H+L),辣根过氧化物标记 Goat Anti-Mouse IgG(H+L),HRP Conjugate -20℃保存

2 ug pBlueScriptR PPP2R1B pBlueScriptR PPP2R1B 低温运输,-20℃保存

20只/袋 口腔拭子(医用简装)   

2 ug pFastBac pFastBac 低温运输,-20℃保存

100µL 小鼠抗GFP标签单抗 Anti GFP-Tag Mouse MAb -20℃保存

1瓶 C127细胞株 C127 低温运输和保存

显色培养基  

500U E.coli DNA聚合 Ι E.coli DNA Polymerase I -20℃保存

过氧化氢(H2O2)测试盒可见分光光度法C9orf86  9号染色体开放阅读框86抗体 规格: 0.2mlD.Aspartic acid  D型天冬抗体 规格: 0.1ml

CCDC147  卷曲螺旋结构域蛋白147抗体 规格: 0.2mlMLX  转化因子样蛋白4抗体 规格: 0.2ml

H Cadherin/CDH13  心脏钙粘蛋白抗体 规格: 0.2mlMouse Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7  PE-Cy7标记的小鼠抗豚鼠IgG 规格: 0.1ml

C11orf21  11号染色体开放阅读框21抗体 规格: 0.2mlRabbit anti-mouse Kappa light chain/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的兔抗小鼠k链 规格: 0.1ml

phospho-PTPN6(Ser591)  磷酸化蛋白酪磷酸1C抗体 规格: 0.1mlVEGF  管内皮生因子抗体 规格: 0.1ml

Rabbit anti-Dog IgG whole serum  兔抗狗IgG抗清 规格: 1mlGADD45 gamma  生抑制DNA损伤基因45γ抗体 GADD45γ 规格: 0.2ml

phospho-Androgen Receptor(Ser660)  磷酸化雄激素受体抗体 规格: 0.1mlNFAT4  核因子活化T细胞胞浆蛋白3抗体 0.2ml

SARM1  SARM1蛋白抗体 规格: 0.2mlTFEB  T淋巴细胞转录调节因子TFEB抗体 规格: 0.1ml

PLCG 2/PLC gamma 2  磷酯Cγ2抗体 规格: 0.2mlSM-MHC  心肌肌球蛋白抗体(α-myosin) 规格: 0.1ml

VWCE  VWCE抗体 规格: 0.2mlGoat Anti-Guinea pig IgG/Gold  胶体金标记的羊抗豚鼠IgG 规格: 0.5ml

Rab3A+Rab3B+Rab3C+Rab3D  ras基因家族Rab3A--Rab3D抗体 规格: 0.2mlMitochondrial Pyruvate dehydrogenase kinase 1  丙酮酸脱激1抗体 规格: 0.1ml

phospho-EGFR (Ser1190)  磷酸化表皮生因子受体抗体 规格: 0.1mlDbx2  大脑发育同源蛋白2抗体 规格: 0.2ml

 


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