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总抗氧化能力(ABTS法)测试盒微量法
参考价:

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更新时间:2023-12-28  |  阅读:587

详情介绍

商品介绍:

测定意义:

测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液,细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。

测定原理:

ABTS法是使用*泛的间接检测方法,可用于亲水性和亲脂性物质抗氧化能力测定。ABTS经氧化后生成稳定的蓝绿色阳离子自由基 ABTS+,能溶于水相或酸性乙醇介质中,在734nm处有最大吸收。被测物质加入ABTS+溶液后,所含抗氧化成分能与ABTS+发生反应而使反应体系褪色。在734nm检测吸光度的变化,并以Trolox作为对照体系量化抗氧化物质的抗氧化能力。

自备实验用品:

恒温水浴锅、低温离心机、分光光度计、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

总抗氧化能力(ABTS法)测试盒微量法

100管/96样

微量法

BK-01S6439

11.png 

实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

250mL Succinate Buffer(琥珀酸缓冲液),0.2M,pH6.0   Succinate Buffer,0.2M,pH6.0   常温保存

1瓶 BHK-21 [C-13]细胞株 BHK-21 [C-13] 低温运输和保存

2 ug pSK1015 pSK1015 低温运输,-20℃保存

10mL RNA溶解液   常温

2 ug pCMV-SPORT6 MAP3K5 pCMV-SPORT6 MAP3K5 低温运输,-20℃保存

FBP溶液 FBP Solution 1ml*5支

25mL 聚乙二醇溶液 Poly(Ethylene Glycol Solution) 4℃保存

50T 人亚甲基四氢还原基因C677T突变PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

1 g Hemoglobin(NO清除剂) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

100mL DIPSO Buffer,0.2M,pH7.4  DIPSO Buffer,0.2M,pH7.4  常温保存

5g 固蓝 BB 盐 Fast Blue BB Salt    -20℃避光保存

总抗氧化能力(ABTS法)测试盒微量法phospho-MYL9(Thr19)  磷酸化肌球蛋白轻链9抗体 规格: 0.1ml

Donkey Anti-Guinea pig IgG/HRP  辣根过氧化物标记的驴抗豚鼠IgG 规格: 0.1ml

phospho-c-Jun(Thr239)  磷酸化原基因c-Jun抗体 规格: 0.1ml

MAP1B  微管相关蛋白1B抗体 规格: 0.2ml

Phospho-LATS1 (Thr1079)  磷酸化瘤抑制基因LATS1抗体 规格: 0.1ml

Calcitonin  降钙素抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-human IgG/PE-CY5  PE-CY5标记的兔抗人IgG 规格: 0.1ml

ADO  2-氨基乙硫醇双加氧抗体 规格: 0.2ml

Rabbit Anti-Biotin/PE  PE标记的兔抗抗体IgG 规格: 0.1ml

alpha 1 Spectrin/Spectrin α  影蛋白/收蛋白抗体 规格: 0.1ml

Goat Anti-Guinea pig IgG/APC  APC标记的羊抗豚鼠IgG 规格: 0.1ml

OAT-1/SLC22A6  阴离子转运蛋白-1抗体 规格: 0.1ml

 


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