详情介绍
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?
对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。
特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称:花青素还原酶(ANR)测试盒微量法
产品规格:100管/96样
检测方法:微量法
产品货号:BK-01S6466
产品分类:氧化与抗氧化系列
商品介绍:
测定意义: 花青素还原酶是黄酮合成途径中的关键酶,在植物体内起非常重要的调控作用,对花青素还原酶的调控机制研究有利于从基因水平改变植物的品质。 测定原理: 花青素还原酶在NADPH存在的条件下作用于飞燕草色素转变为表没食子儿茶素和NADP,使反应体系在340nm处的吸光值下降,吸光值下降速率反应了花青素还原酶的活性。 需自备的仪器和用品: 天平、研钵、低温离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、蒸馏水。 |
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本: 取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行 匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。 【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
| ② 细菌/细胞样本: 先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次); 12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10 4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。 |
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
亮绿乳糖胆盐培养液(BGB) Brilliant Green Lactose Bile Broth 250g
1瓶 MEF细胞株 MEF 低温运输和保存
MI培养基 MI Medium 1000ml
5g 腺硫酸盐 Adenine Sulfate 避光保存
100mL TEA Buffer,0.2M,pH7.0 TEA Buffer,0.2M,pH7.0 常温保存
10g 甜菜碱 Betaine 4℃保存
2 ug pGCsi/H1/Neo/GFP Survivin pGCsi/H1/Neo/GFP Survivin 低温运输,-20℃保存
抗生素检定培养基6号 Antibiotic Agar NO.6 250g
1瓶 Dami细胞株 Dami 低温运输和保存
含接触皿培养基平板(5.5cm) Contact Plate Medium 10个/包
1000U 大肠杆菌DNA连接(E.coli Ligase) E. coli DNA Ligase -20℃保存
花青素还原酶(ANR)测试盒微量法PMP2 周围神经髓鞘蛋白2抗体 规格: 0.2mlMAL/MPV17 T淋巴细胞成熟相关蛋白抗体 规格: 0.2ml
phospho-PRKAA2(Ser173) 苷单磷酸活化蛋白激α2抗体 规格: 0.1mlMARCH1 膜相关环指蛋白1抗体 规格: 0.2ml
L-Citrulline L-瓜抗体 规格: 0.2mgABHD13 水解结构域蛋白13抗体 规格: 0.2ml
FAST kinase Fas活化的丝/苏激抗体 规格: 0.1mlUBE2A/UBE2B/RAD6 泛素结合E2蛋白A抗体 规格: 0.2ml
phospho-LSP1 (Ser252) 磷酸化白细胞F肌动蛋白结合蛋白抗体 规格: 0.1mlHIF3 alpha 缺氧诱导因子3α/HIF-3α抗体 规格: 0.1ml
CT DNA(calf thymus DNA) 小牛胸DNA抗体 规格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗人IgG 规格: 0.1ml
FRMD5 FRMD5蛋白抗体 规格: 0.2ml
NOX2/gp91phox NADPH氧化2抗体 规格: 0.1ml
FLAG Tag (NT) FLAG Tag标签抗体(N端) 规格: 0.1ml
Mouse Anti-human IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的小鼠抗人IgM 规格: 0.1ml
phospho-RPS6KB1(Ser441+Thr444) 磷酸化核糖体S6蛋白激抗体 规格: 0.1ml