详情介绍
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称:单宁酶(TAN)测试盒微量法
产品规格:100管/48样
检测方法:微量法
产品货号:BK-01S6458
产品分类:氧化与抗氧化系列
商品介绍:
测定意义: 单宁酶全称是单宁酯酰水解酶(Tannase,EC 3.1.1.20),它可以水解没食子酸单宁中的酯键和缩酚羧键,生成没食子酸和葡萄糖。 测定原理: 使用抗氧化剂没食子酸丙酯(PG)作为单宁酶酶促反应的底物,在270nn下测定底物PG反应前后的光密度变化,计算单宁酶酶活力。 需自备的仪器和用品: 紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰、蒸馏水。 |
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本: 取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行 匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。 【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
| ② 细菌/细胞样本: 先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次); 12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10 4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。 |
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?
对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。
1g Heparin Sodium Salt 4℃避光保存
50T 副溶血性弧菌PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
100mL 一管式TMB显色液B (沉淀型) One-Tube TMB Chromogenic Solution 2-8℃避光保存
2 ug SuperCos 1 SuperCos 1 低温运输,-20℃保存
1套 硅胶膜DNA离心吸附柱(大提) Silica Spin Column Maxiprep 常温
2 ug pAcGFP1-1 pAcGFP1-1 低温运输,-20℃保存
营养琼脂平板(9cm) Nutrient Agar 10个/包
1瓶 Bel-7402/FU细胞株 Bel-7402/FU 低温运输和保存
Half-Fraser培养基颗粒 Half-Fraser Medium 225ml/袋*10
1000U p19 siRNA 结合蛋白 p19 siRNA Binding Protein -20℃保存
250mL NP40 Lysis Buffer,Low Salt(低盐型NP40裂解液) NP40 Lysis Buffer,Low Salt 常温保存
单宁酶(TAN)测试盒微量法PNPO 磷酸吡哆醇氧化抗体 规格: 0.2mlSLAMF9 CD2F-10抗体 规格: 0.2ml
phospho-MAP1LC3A(Ser12) 磷酸化自噬微管相关蛋白轻链3抗体 规格: 0.1mlGoat Anti-rabbit IgG/Bio 标记的羊抗兔IgG 规格: 0.1ml
Retinoic acid induced 17 维甲酸诱导蛋白17抗体 规格: 0.2mlCYP46 24S-羟化 规格: 0.2ml
FLAG Tag(CT) FLAG Tag标签抗体(C端) 规格: 0.1mlphospho-ATM(Ser1981) 磷酸化毛细管扩张性共济失调症突变蛋白抗体 规格: 0.1ml
TEM7R/Plxdc2 瘤管内皮标记相关蛋白质7抗体 规格: 0.2mlPhospho-MAPKAPK2 (Thr222) 磷酸化丝裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗体 规格: 0.1ml
phospho-ATG3 (Tyr18) 磷酸化自噬相关蛋白3抗体 规格: 0.1mlC11orf73 11号染色体开放阅读框73抗体 规格: 0.2ml
Phospho-TAK1(Thr187) 磷酸化转化生因子β活化激1 规格: 0.1mlCOLEC11 凝集蛋白家族11抗体 规格: 0.2ml
Nogo-A 轴索过度生抑制因子-A抗体 规格: 0.1mlPhospho-FHIT (Tyr114) 磷酸化脆性组三联体抗体 规格: 0.1ml
BRLF1 立即早期基因BRLF1抗体(鼻咽基因) 0.2mlPhospho-HP1 gamma (Ser93) 磷酸化染色质相关蛋白1-γ抗体 规格: 0.1ml
TSARG4 生细胞凋亡相关基因4抗体 规格: 0.1mlDUX3 DUX3蛋白抗体 规格: 0.2ml
MARCH8 膜相关环指蛋白8抗体 规格: 0.2mlPKA gamma 蛋白激Aγ抗体 规格: 0.2ml
MDGA2 神经元膜糖蛋白锚定蛋白2抗体 规格: 0.2mlKCNA5 钾电压阀门通道混合器相关亚家族成员5抗体 规格: 0.2ml