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尿酸(UA)含量测试盒可见分光光度法
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更新时间:2023-12-28  |  阅读:411

详情介绍

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:尿酸(UA)含量测试盒可见分光光度法

产品规格:50管/48样

检测方法:可见分光光度法

产品货号:BK-01S6450

产品分类:氧化与抗氧化系列
商品介绍:

测定意义:

UA是鸟类和爬行类动物的主要代谢产物,正常人体尿液中产物主要为尿素,含少量尿酸。此外,UA还是重要的抗氧化剂,能清除超氧化物,羟自由基等。体内UA生成量和排泄量不平衡会导致多种疾病的发生。例如,血中UA升高会引起痛风、肾功能损害和动脉硬化,相反UA降低会引起恶性贫血,在临床诊断上具有重要的意义。

测定原理:

尿酸酶能催化UA生成CO2H2O2H2O2 氧化亚铁中的Fe2+ 生成Fe3+ Fe3+进一步与酚和4-氨基缩合生成红色醌类化合物,在505nm下有特征吸收峰,测定反应体系505nm的吸收值,可计算尿酸的含量。

需自备的仪器和用品:

恒温水浴锅、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿和蒸馏水。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

100mL AMP Buffer,0.5M,pH10.5  AMP Buffer,0.5M,pH10.5  常温保存

50uL 电泳级耐热型SYBR染料 SuperSYBR,EG 常温闭光

2 ug pGEMEX-1 pGEMEX-1 低温运输,-20℃保存

抗生素检定培养基9号 Antibiotic Agar NO.9 250g

1瓶 DLD-1细胞株 DLD-1 低温运输和保存

BCYE-CYS琼脂平板(9cm) BCYE-CYS Agar 10个/包

1000U T4 RNA连接(T4 RNA Ligase) T4 RNA Ligase -20℃保存

乳酸杆菌选择性琼脂 Lactobacillus Selective Agar 250g

1 管 JM103大肠杆菌 JM103 E.coli Strain -80℃保存

2 ug pPinPoint-Xa3 pPinPoint-Xa3 低温运输,-20℃保存

乳糖发酵管  20支

尿酸(UA)含量测试盒可见分光光度法FOG1  GATA结合蛋白1伴侣蛋白抗体 规格: 0.2ml

PCNA(1C11)  小鼠增细胞核抗原单克隆抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-chicken IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350标记的兔抗鸡IgG 规格: 0.1ml

VNN1  管非症分子1抗体 规格: 0.2mlCCL21/6Ckine  淋巴细胞趋化因子CCL21抗体 规格: 0.1ml

phospho-MCK10/CD167a/DDR1(Tyr513)  磷酸化神经上皮酪激抗体(激10) 规格: 0.1mlGoat Anti-Bovine IgG/PE-Cy3  PE-Cy3标记的羊抗牛IgG 规格: 0.1ml

phospho-FADD(Ser194)  磷酸化Fas死亡结构域相关蛋白抗体 规格: 0.1mlMouse Anti-human IgM/AP  碱性磷酸(AP)标记的小鼠抗人IgM 规格: 0.1ml

URG4 (C terminal)  上调基因4抗体(C端) 规格: 0.2mlPhospho-Rb (Ser608)  磷酸化视网膜母细胞瘤相关蛋白1抗体 规格: 0.1ml

Renin  素/管紧张素形成Ren1抗体 规格: 0.1mlITPR3  5-三磷酸肌醇受体3抗体 规格: 0.2ml

NHE1/APNH1  钠通道蛋白抗体 规格: 0.2mlTMEM74  跨膜蛋白74抗体 规格: 0.2ml

FAM82A1/RMD2  微管动力调节蛋白2抗体 规格: 0.2mlphospho-CDKN1A/P21 (Thr57)  磷酸化p21蛋白抗体 规格: 0.1ml

NALP4  /睾抗原58抗体 规格: 0.2mlphospho-C-Myc(Thr373)  磷酸化致基因C-Myc抗体 规格: 0.1ml

5HTR3B/5HT3B receptor  5-羟色胺受体3B抗体 0.1mlPhospho-TIF1 beta(Ser824)  磷酸化转录中介因子Tif1β抗体 规格: 0.1ml 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

 


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