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半胱氨酰亚砜裂解酶(CSL)测试盒微量法
参考价:

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更新时间:2023-12-27  |  阅读:662

详情介绍

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:半胱氨酰亚砜裂解酶(CSL)测试盒微量法

产品规格:100管/48样

检测方法:微量法

产品货号:BK-01S6528

产品分类:氨基酸代谢系列
商品介绍:

测定意义:

半胱氨酰亚砜裂解酶(CSL)广泛存在于百合科葱属(如大蒜和洋葱),十字花科芸薹属

(如卷心菜,菜花,西兰花),以及豆科中的合金欢属中,并通常被称为蒜酶(Alliinase)。香菇酸在γ-谷氨酰转肽酶和半胱亚砜裂解酶的作用下转化成香菇精,以及产生丙酮酸、乙醛、甲醛和NH3CSL是内源性甲醛生成的关键酶之一,测定CSL活性对于研究食品安全具有重要意义。

测定原理

CSL催化S-甲基-L-半胱亚砜反应产生丙酮酸,与2,肼反应,在碱性条件下显棕红色,在510nm下有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、研钵、离心机、分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅、蒸馏水。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

50 T GSH试剂盒(肽测试盒)(比色法) Oxidative Stress Detection Kit 常温保存

500mL Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH4.0  Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH4.0  常温保存

30次 通用型全基因组扩增试剂盒 Universal WGA Kit -20℃保存

2 ug pLVX-aMHC GFP pLVX-aMHC GFP 低温运输,-20℃保存

胰胨琼脂培养基  250g

1瓶 OKT 11细胞株 OKT 11 低温运输和保存

胰化大豆琼脂(TSAM)  250g

1g 溴甲绿 Bromocresol Green Sodium Salt 室温保存

250m Triton Lysis Buffer   Triton Lysis Buffer   常温保存

1mL APMSF溶液,10mg/mL APMSF Solution -20℃保存

250mL Sucrose Gelatin Veronal Buffer (SGVB)   Sucrose Gelatin Veronal Buffer (SGVB)   常温保存

半胱氨酰亚砜裂解酶(CSL)测试盒微量法Phospho-JunB (Thr102/Thr104)  磷酸化活化蛋白激B抗体 规格: 0.2mlCD171/NCAM-L1  神经细胞粘附分子配体1抗体 规格: 0.1ml

Mammaglobin A  珠蛋白1抗体 0.2mlphospho-P53(Ser37)  磷酸化瘤抑制基因P53抗体 规格: 0.1ml

CYP450  细胞色素P450单氧化抗体 规格: 0.1mlHERG/KCNH2/ERG  特异性钾离子通道蛋白抗体 规格: 0.1ml

phospho-ATR/ACTR(Ser428)  磷酸化ATR抗体 规格: 0.1mlPhospho-BTK/BPK(Tyr223)  磷酸化蛋白酪激ATK抗体 规格: 0.1ml

Mouse Anti-Goat IgG/PE-CY5  PE-CY5标记的小鼠抗羊IgG 规格: 0.1mlPhospho-Wee1(Ser123)  磷酸化WEE1蛋白抗体 规格: 0.1ml

PAFAH2/Lp-PLA2  脂蛋脂A2抗体 规格: 0.1mlphospho-CRK (Ser41)  磷酸化CRK抗体 规格: 0.1ml

phospho-IRS1(Ser332/336)  磷酸化胰岛素受体底物-1抗体 规格: 0.1mlphospho-APP/ABPP(Thr743)  磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体 规格: 0.1ml

Cdc25A  细胞分裂周期蛋白25抗体 规格: 0.1mlSTEAP1  前列跨膜上皮1抗原抗体 规格: 0.2ml

Rabbit Anti-rat IgG/Cy5  Cy5标记的兔抗大鼠IgG 规格: 0.1mlGoat Anti-rabbit IgG/AP  碱性磷酸(AP)标记的羊抗兔IgG 规格: 0.1ml

VWF  管假性友因子/管性友因子抗体 规格: 0.1mlNogo R  轴索过度生抑制因子受体/Nogo受体抗体 规格: 0.1ml

ETK/BMX  非受体性蛋白酪激ETK抗体 规格: 0.1mlP2RX4  三磷酸苷门控阳离子通道蛋白抗体 规格: 0.2ml

phospho-Beta-catenin(Tyr86)   磷酸化β 连环素蛋白抗体 规格: 0.1ml 

 


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