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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
SPN Others Mouse 小鼠 SPN / CD43 人细胞裂解液 (阳性对照) 布地奈德-d8Budesonide-d8质量规格：美国进口

EJ 人膀胱癌细胞6α-羟基布地奈德6α-Hydroxy Budesonide质量规格：美国进口

SW1116人结肠腺癌细胞 SW1116 human colon adenocarcinoma cells L-15培养基(GIBCO)+10%FBS6β-羟基布地奈德6β-Hydroxy Budesonide质量规格：美国进口

CD70 Protein Rat 重组大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 标签)亚叶酸钙水合物Folinic acid calcium salt hydrate质量规格：美国进口

人脂肪细胞-内脏(HPA-v)(1×106 ) MDA-MB-231(ATCC来源), 人癌细胞 Human喜树碱钠盐 Camptothecin质量规格：美国进口
IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 倍他环糊精,2,6-二-β-环糊精Me-β-CD质量规格：>98%,BR

IMR-32 人神经母细胞瘤细胞埃博霉素B；帕土匹龙Epothilone B(EPO906, Patupilone) 质量规格：>98%,BR

CEM/C1人急性细胞白血病细胞 CEM/C1 human acute lymphoblastic leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSA 83-01;A83-01A8301质量规格：>98%,BR

VEGFA Protein Mouse 重组小鼠 VEGFA / VEGF164 蛋白Amresco 进分琼脂粉Agar质量规格：BR,进分

小鼠垂体细胞(MPC)(5×105) 5637, 人膀胱癌细胞 Human氟伏沙明Fluvoxamine质量规格：>98%,油状
REG1B Others Human 人 REG1B / PSPS2 人细胞裂解液 (阳性对照) 溴百里酚蓝钠盐25克

猫星形脑胶质细胞;PG-4(S+L-)2，4-二叔丁基本酚，99%A 2,4-Di-tqrt-butylphqnol 96-76-4

CDCP1 Others Human 人 CDCP1 / CD318 人细胞裂解液 (阳性对照) 粘蛋白胭脂红5KU

人前列腺平滑肌细胞*培养基 100mL四本硼钾100毫克保存：-20℃

A-431细胞，人表皮癌细胞 流感嗜血杆菌 BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.11975-50-42--3-硝基本2-metxyl-3-nitnobenzoic acid
c-Jun Phospho-Ser243 AntibodyIL13RA2 Others Rat 大鼠 IL13RA2 / IL13R 人细胞裂解液 (阳性对照) 四氢嘧啶羧酸(>98%，BR)Ectoine质量规格：>98%，BR

人视网膜muller细胞*培养基 100mL氧化镁碳酸钠合剂Eschka's mixture质量规格：BC

GH3细胞，大鼠埀体瘤细胞 5637(人膀胱癌细胞) 非洲绿猴肾细胞;Vero E6乙酯(>98%,BR)Ethyl dodeconoate质量规格：>98%,BR

EFNA1 Protein Human 重组人 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His & Fc 标签)乙基曙红(>95%,BS)Ethyl eosin质量规格：>95%,BS

HCCLM3(人高转移肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2 肝窦内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)没食子酸乙酯Ethyl gallate质量规格：>98%,BR
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。