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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
QGY-7701(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 EphA3 人细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸组氨瑞林 Histrelin Acetate质量规格：BR,度>98%

人结直肠腺癌细胞;COLO 205青霉素V钾Penicillin V potassium salt质量规格：1440~1680 U/mg,BR

CD47 Others Human 人 CD47 人细胞裂解液 (阳性对照) 2'-脱氧肌苷2'-deoxyinosine质量规格：>98%,BR

mEPC, 小鼠内皮祖细胞-骨髓盐酸尼非卡兰Nifekalant 质量规格：>98%,BR

3T3TK细胞，小鼠成纤维细胞 TNFa转染耐VP16绒癌细胞,JEG-3-VP16-TNFa细胞 人滑膜细胞RNAHS miRNA5 μg盐酸尼非卡兰(标准品)Nifekalant 质量规格：HPLC>99%,标准品
EJ(人膀胱癌细胞) 5×106cells/瓶×2 肺大静脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)芍药苷(50%)Paeoniflorin质量规格：≥50%,BR

间充质干细胞脂肪细胞分化培养基MADM-prf芍药苷(90%)Paeoniflorin质量规格：≥90%

CDCP1 Others Mouse 小鼠 CDCP1 人细胞裂解液 (阳性对照) 5,6-二-1,10-菲咯啉(>98.0%(T))5,6-Dimethyl-1,10-phenanthroline质量规格：>98.0%(T)

大鼠肺成纤维细胞*培养基 100mL2,9-二丁基-1,10-邻二氮杂菲(>96.0%(HPLC))2,9-Dibutyl-1,10-phenanthroline质量规格：>96.0%(HPLC)

CTLA4 Ig-24细胞，中国仓鼠卵巢细胞 SK-OV-3 [SKOV-3](人卵巢癌细胞) CM-H002人肺大动脉内皮细胞*培养基100mL2,9-二苯基-1,10-菲咯啉(>98.0%(HPLC)(T))2,9-Diphenyl-1,10-phenanthroline质量规格：>98.0%(HPLC)(T)
CL-0046C4-2(人前列腺癌细胞)5×106cells/瓶×25--2-脱氧胞苷25克

HSC-T6, 大鼠肝星状细胞系6-溴己醋 6-BroMohqxcnoic ccid;6-BroMoccproic ccid 44-70-8

EB病毒转化的人B细胞(彝族);HYL 人腹膜内皮细胞*培养基 100mLSILVERnitnATE肖酸银蛋白组学级25GRT

牛脑垂体提取物BPE丽春红2R100克2～8°C

EPHB2 Others Mouse 小鼠 EphB2 / Hek5 人细胞裂解液 (阳性对照) POPSO 10g/100g原装 Sigma P3405
肌氨酸氧化酶EB病毒转化的人B细胞;KMY0909 人软骨细胞*培养基 100mL头孢呋辛钠(标准品)Cefuroxime  质量规格：效价测定

水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S5头孢曲钠Ceftriaxone  质量规格：potency>980ug/mg,BR

IFNB1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 人细胞裂解液 (阳性对照) 头孢曲钠（标准品）Ceftriaxone  质量规格：HPLC>98%,标准品

CL-0197RL95-2(人内膜癌细胞)5×106cells/瓶×2头孢他啶(含碳酸钠)Ceftazidime with  Carbonate 质量规格：94.0-105.0%,USP,BR

Hut-78细胞，皮肤T细胞瘤 人血管平滑肌,T/G细胞 人低侵袭性脉络膜色素素瘤细胞;OCM-1A头孢唑啉钠Cefazolin 质量规格：>95%,BR
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。