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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
PLC/PRF/5(人肝癌亚力山大细胞) 5×106cells/瓶×2 293T/17 [HEK 293T/17] (人胚肾细胞)Boc-L-beta-谷氨酸5-苄酯质量规格：0.98Boc-L-ß-homoaspartic acid 5-benzyl ester

CL-0236U-2 OS(人骨肉瘤细胞)5×106cells/瓶×2Fmoc-L-β-谷氨酸5-叔丁基酯质量规格：>98%,BRFmoc-β-homoaspartic acid

IL1R1 Others Human 人 IL1R1 / CD121a 人细胞裂解液 (阳性对照) Fmoc-L-beta-高谷氨酸6-叔丁酯质量规格：0.98Fmoc-L-β-Homoglutamic acid 6-tert-butyl ester

人肺动脉成纤维细胞cDNAHPAF cDNA高精氨酸质量规格：98%，BR，L型H-HomoArg-OH

HCC38细胞，人导管癌细胞 昆虫细胞系,SF-9细胞 肝动脉内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)BOC-D-缬氨酸质量规格：>98%,BRBoc-D-Val-OH
间充质干细胞成骨细胞分化生长添加物MODS杯[6]芳烃(>95.0%(HPLC))Calix[6]arene质量规格：>95.0%(HPLC)

IL13RA1 Others Rat 大鼠 IL13RA1 人细胞裂解液 (阳性对照) 4-叔丁基杯[6]芳烃(含5-10%的苯)(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylcalix[6]arene (contains 5-10% Benzene)质量规格：>98.0%(HPLC)

人牙周膜成纤维细胞*培养基 100mL4-叔丁基-1-(乙氧羰基甲氧基)硫杂杯[4]芳烃(>94.0%(HPLC))4-tert-Butyl-1-(ethoxycarbonylmethoxy)thiacalix[4]arene质量规格：>94.0%(HPLC)

T6-Swiss albino细胞，小鼠胚胎成纤维细胞 B16(小鼠色素瘤细胞) 非洲绿猴肾细胞;BS-C-14-叔丁基磺酰杯[4]芳烃(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylsulfonylcalix[4]arene质量规格：>98.0%(HPLC)

EFNA3 Protein Human 重组人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白4-磺酸基硫杂[4]芳烃钠盐(>98.0%(HPLC))4-Sulfothiacalix[4]arene  Salt质量规格：>98.0%(HPLC)
人肾脏上皮细胞HREpiC4-羟基心得安β-D-葡萄糖苷酸 质量规格：美国进口4-Hydroxy Propranolol β-D-Glucuronide

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/New York/18/2009) HA 人细胞裂解液 (阳性对照) S(-)-盐酸心得安质量规格：美国进口S(-)-Propranolol • HCl

IEC-6 大鼠小肠引窝上皮细胞雷洛昔芬-d4质量规格：美国进口Raloxifene-d4

CM-H115人脑动脉血管内皮细胞*培养基100mL雷洛昔芬6-葡萄糖苷酸质量规格：美国进口Raloxifene 6-Glucuronide

U266B1 [U266], 人多发性骨髓瘤细胞(+)-儿茶素水合物质量规格：HPLC>98%,进分(+)-Catechin hydrate
磷酸葡萄糖变位酶EC 5.4.2.2输尿管上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)叔丁氧羰基-L-天冬氨酸-4-叔丁酯 Boc-Asp(OtBu)-OH质量规格：>98%,BR

CREB3L1 Others Human 人 CREB3L1 / OASIS (aa 396-519) 人细胞裂解液 (阳性对照) BOC-D-脯氨酸Boc-D-Pro-OH质量规格：>99%,BR

大鼠气管上皮细胞;RTEBOC-L-丝氨酸甲酯Boc-Ser-OMe质量规格：BR

PG49细胞，人肺腺癌细胞系 转S9基因仓鼠卵巢细胞,ZA1细胞 CL-0042BxPC-3(人原位胰腺腺癌细胞)5×106cells/瓶×2N-BOC-O-苄基-L-丝氨酸N-BOC-O-Benzyl-L-serine质量规格：0.98

SVEC4-10(小鼠结内皮细胞) 5×106cells/瓶×2BOC-L-苏氨酸Boc-Thr-OH质量规格：>98%,BR
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。