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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
NGF Others Human 人 β-NGF / Beta-NGF CHO细胞裂解液 (阳性对照) 肌苷(标准品)质量规格：HPLC>98%,标准品Inosine

角膜上皮细胞培养基CEpiCM-prf5‘-腺嘌呤核苷酸二钠盐(AMP2Na)质量规格：>98%,BR5'-AMP-Na2

婆罗门牛皮肤成纤维样细胞;BOS-4 白血病原髓细胞，HL-60细胞 Dami(巨核细胞白血病细胞)灭菌唑(分析标准品,99.2%)质量规格：分析标准品,99.2% Triticonazole

EB病毒转化的人B细胞;KMY0901标准溶液(10μg/ml,u=6%)质量规格：10μg/ml,u=6%Tsumacide solution

BAMBI Others Human 人 BAMBI / NMA 人细胞裂解液 (阳性对照) 嗪氨灵(标准品)质量规格：分析标准品Triforin
BRL(大鼠肝细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M054小鼠成纤维细胞*培养基100mL 人结直肠腺癌细胞;Caco-2五甲氧基红(>98.0%(HPLC))Pentamethoxy Red质量规格：>98.0%(HPLC)

恒河猴皮肤细胞;RM-S1苯橙(>95.0%(W))Benzyl Orange质量规格：>95.0%(W)

NCF2 Others Human 人 NCF2 / NCF-2 / P67phox 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 3,4,5-三咖啡酰奎宁酸(标准品)3,4,5-Tricaffeoylquinic acid质量规格：HPLC≥98%，标准品

胰腺星状细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)泽泻醇A醋酸酯Alisol A 24-acetate质量规格：HPLC≥98%，标准品

恒河猴肾细胞;RM-3 人卵巢透明细胞癌细胞，ES-2细胞 ZR-75-30(癌细胞)泽泻醇C-23-醋酸酯;泽泻醇C单乙酸酯Alisol C monoacetate 质量规格：HPLC≥98%，标准品
人支气管平滑肌细胞*培养基 100mL地布卡因质量规格：美国进口Dibucaine

MuM-2C细胞， 人眼脉络色素瘤细胞 赭绿青霉 小鼠成纤维细胞;φ2盐酸地布卡因-d9质量规格：美国进口Dibucaine-d9

ANGPT2 Protein Human 重组人 Angiopoietin-2 / ANG2 蛋白 (Fc 标签)多利培南质量规格：美国进口Doripenem

LLC(小鼠肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 多沙普仑质量规格：美国进口Doxapram

水貂肺上皮细胞;Mv.1.Lu(NBL-7)奥沙拉秦钠质量规格：>98%,BROlsalazine di
AvaIIEco47I ，10 U/µLMA-891(小鼠癌高转移细胞) 5×106cells/瓶×2 脑成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)曲克芦丁（标准品）Troxerutin质量规格：HPLC法含量测定

神经星形胶质细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)二羟丙茶碱（标准品）Diprophylline质量规格：含量测定

ANGPTL4 Others Human 人 ANGPTL4 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸地巴唑（标准品）Bendazol 质量规格：HPLC法含量测定

大鼠肾足突细胞*培养基 100mL1酸氯喹（标准品）Chloroquine diphosphate质量规格：HPLC法含量测定

AE-1杂交瘤细胞抗AChE AE-1 hybridoma cells against AChE DMEM+10% Hyclone 灭活血清盐酸异丙嗪（标准品）Promethazine 质量规格：含量测定
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。