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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
NCR2 Others Human 人 NKp44 / NCR2 / CD336 人细胞裂解液 (阳性对照) Delta-催激素质量规格：>95%,BRDelta-MSH

小鼠树突状细胞肉瘤细胞;DCS内皮素2，人，犬质量规格：>95%,BREndothelin 2 (human, canine)

CD300LG Others Human 人 CLM-9 / EM4 / CD300LG 人细胞裂解液 (阳性对照) 内皮素3，人，大鼠质量规格：>95%,BREndothelin 3, human, rat

SK-N-BE(2)人神经母细胞瘤细胞 SK-N-BE (2) in human neuroblastoma cell MEM 45%+/F12 45%+10% FBS趋嗜曙红细胞肽质量规格：>95%,BREosinophilotactic Peptide

TG-905细胞，人脑胶质母细胞瘤细胞 荧光假单胞菌 人滋养层绒毛细胞总RNAHVT NA结晶玫瑰(>98%,BR)质量规格：>98%,BRα-(Trichloromethyl)benzyl acetate
F9 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor IX / FIX / F9 人细胞裂解液 (阳性对照) 4,4'-异亚丙基二苯氧基乙酸(>98.0%(HPLC)(T))4,4'-Isopropylidenediphenoxyacetic Acid质量规格：>98.0%(HPLC)(T)

HL-60 人原髓细胞白血病细胞四溴双酚A(>98.0%(GC)(T))Tetrabromobisphenol A质量规格：>98.0%(GC)(T)

COLO 320DM 人结直肠腺癌细胞 COLO 320DM human colorectal adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS2-乙酰氨基-2-脱氧-D-半乳糖醛酸2-Acetamido-2-deoxy-D-galacturonic Acid质量规格：美国进口

PGF Protein Mouse 重组小鼠 PIGF / PLGF 蛋白2-去乙氧基-2-羟基-1氢-1-乙基坎地沙坦酯2-Desethoxy-2-hydroxy-1H-1-Ethyl Candesartan Cilexetil质量规格：美国进口

大鼠周神经成纤维细胞(RPNF)(5×105) HEC-1A, 人内膜癌细胞系 Human坎地沙坦酯甲氧基类似物Candesartan Cilexetil Methoxy Analogue质量规格：美国进口
小鼠海马趾神经细胞(MH-h)(1×106)还原靛蓝，英文名或英文缩写：Indigo，级别：CP，98%，规格：1毫克

犬源细胞硼醋 Boric ccid (cS);Borofcx 11113-20-1

小鼠骨髓瘤细胞;P3/NSI/1-Ag4-1 小鼠胎儿表皮角质形成层细胞*培养基 100mL茜素红S，英文名或英文缩写：Alizarin red，级别：FMP，50%，规格：5克

COS-7L, 非洲绿猴肾成纤维细胞 其它GENEPAGEPLUS5.25%6MUREA*CLDPAK5.25% GENE PAGE PLUS, 6M 尿素生物技术级100MLCOLD

ACHE Others Mouse 小鼠 AcetylCHOlinesterase / ACHE 人细胞裂解液 (阳性对照) Nicotinicacid 25g/100g/500g/1kg原装 Sigma N4126
AatII10 U/µLEPHB1 Others Mouse 小鼠 EphB1 / EPHT2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 庆大霉素（标准品）Gentamicin质量规格：效价测定

人胚肺成纤维细胞;HFL-I利福霉素SV（标准品）Rifamycin 质量规格：效价测定

F81细胞，猫肾细胞 人结肠癌细胞,LS174T细胞 CM-H085人脐动脉平滑肌细胞*培养基100mLSL327SL-327质量规格：>98%，MEK1/2抑制剂

正常大鼠肾细胞(EGF受体阳性);NRK49F麦迪霉素（标准品）Midecamycin质量规格：效价测定

SCARB1 Others Human 人 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 妥布霉素（标准品）Tobramycin Base质量规格：效价测定
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。