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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
NCI-H1299(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) N-去罗格列酮-d4质量规格：美国进口N-Desmethyl Rosiglitazone-d4

原代心肌细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装：500/100ml罗格列酮（钾盐）质量规格：美国进口Rosiglitazone (potassium salt)

EDAR Others Rat 大鼠 EDAR 人细胞裂解液 (阳性对照) 罗格列酮盐酸盐质量规格：美国进口rosiglitazone

大鼠胎儿表皮角质形成层细胞*培养基 100mL5-羟基罗格列酮质量规格：美国进口5-Hydroxy Rosiglitazone

HaCaT人永生化表皮细胞 HaCaT immortalized human epidermal cells DMEM+10% FBS去甲异波尔定（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Norisoboldine
Hs68(人男性正常细胞) 5×106cells/瓶×2 变异链球菌碳酸锶(>98%,BC)Strontium carbonate质量规格：>98%,BC

冠状动脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)硫酸锶(>98%,BC)Strontium sulfate质量规格：>98%,BC

TLR3 Others Mouse 小鼠 TLR3 / CD283 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2'-甲氧基胞苷2’-OMe Cytidine质量规格：>98%,BR

人前列腺癌低转移细胞株;PC-3M-2B4N2-异丁酰基鸟苷一水合物ibu-rG质量规格：>98%,BR

FO细胞，骨髓瘤细胞 人胚肝二倍体细胞,CCC-HEL-1细胞 CL-0208SH-SY5Y(人神经母细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2N4-苯甲酰胞苷Bz-rC质量规格：>98%,BR
TLR2 Others Rat 大鼠 TLR2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) GENEPAGE6%EZSQUEEZE*CLDPAK*6% GENE-PAGE, 挤压式瓶装生物技术级10X75MLCOLD

HK-2, 人肾皮质近曲小管上皮细胞氧基三本基录化鏻 (Mqthoxymqthyl)triphqnylphosphonium chloridq 4009-98-7

RN-s, 大鼠纹状体神经元 [X464-20C]细胞 Vero(非洲绿猴肾细胞)左卡泥汀相关物质A Lqvoccrnitinq Rqlctqd CoMpound c;3-ccrboxy-N,N,N-triMqthyl-2-propqn-1-cMiniuM chloridq 6238/8/2

人十二脂肠腺癌;HuTu-80抑肽酶(牛肺)容量：RT25克

CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 人细胞裂解液 (阳性对照) N-芴甲氧羰酰基-L-亮酸NA
2×Cobuddy MasterMixDyeF11 Others Human 人 F11 / FXI 人细胞裂解液 (阳性对照) 羟基1灰石Hydroxyapatite质量规格：>99%,粒径20nm

上皮细胞生长添加物-2EpiCGS-2羟丙基纤维素(粘度11250-21000mPas)Hydroxy Propyl Methyl Cellulose/HPMC K15M质量规格：粘度11250-21000mPas

CTNNB1 Others Human 人 beta-Catenin / CTNNB1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 羟丙基纤维素Hydroxypropylmethylcellulose质量规格：粘度55 - 60 mPa.s

人前列腺癌细胞;DU 145 [DU145;DU-145]羟丙基纤维素(30000 mpa.s)HPMC, hydroxypropyl methyl cellulose质量规格：30000 mpa.s,BR

S-180细胞，腹水瘤细胞 人结肠癌细胞,CRL-2780细胞 非洲绿猴肾细胞;VERO羟丙基纤维素（4000mpas）HPMC, hydroxypropyl methyl cellulose质量规格：粘度K4m，4000 mpa.s
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。