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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人细胞裂解液 (阳性对照) 舒林酸（标准品）质量规格：检查Sulindac

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-E2HSP990质量规格：>98%,Hsp90抑制剂NVP-HSP990

中国仓鼠肺细胞;R 1610 [R1610] 口腔表皮样癌细胞，KB细胞 CIK细胞，草鱼肾脏细胞盐酸妥拉唑林（标准品）质量规格：含量测定Tolazoline HCl

人胚胎眼巩膜成纤维细胞;HFSF盐酸硫利达嗪（标准品）质量规格：鉴别Thioridazine

HA Others H13N8 甲型流感 H13N8 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 庆大霉素（标准品）质量规格：效价测定Gentamicin
SFTPD Others Mouse 小鼠 SFTPD 人细胞裂解液 (阳性对照) 异鸟苷水合物Isoguanosine Hydrate质量规格：美国进口

狗肾恶性组织细胞增生症细胞;DH823,5-O-(1,1,3,3-四异丙基-1,3-二硅氧烷)腺苷3',5'-O-(1,1,3,3-Tetraisopropyl- 1,3-Disloxanediyl)Adenosine  质量规格：美国进口

FGFR2 Others Human 人 FGFR2 / CD332 (aa 400-821) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 21-乙酰氧基孕1醇酮21-Acetoxypregnenolone质量规格：BR,美国进口

CL-0113HO-8910(人卵巢癌细胞)5×106cells/瓶×2珊瑚菜内酯，珊瑚菜素(标准品)phelloptorin质量规格：HPLC≥98%，标准品

THP-1人单核白血病细胞 低分化结肠腺癌细胞,HCT-116细胞 SK-MES-1(肺鳞癌细胞)鞣花酸(标准品)Ellagic acid质量规格：HPLC≥98%，标准品
3T3TK细胞，小鼠成纤维细胞 TNFa转染耐VP16绒癌细胞,JEG-3-VP16-TNFa细胞 人滑膜细胞RNAHS miRNA5 μgTHIOUREA蛋白组学级500G62-56-6RT

SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-1(±)新烟减 (-)-cNcBcSINq 13078-04-1

EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK 人细胞裂解液 (阳性对照) L-本炳安醇 L-Phqnylglycinol 318-92-4

人结直肠腺癌细胞;Caco-2L-天冬酸5克RT

USP46 Others Human 人 USP46 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) N-芴甲氧羰酰基-L-蛋酸NA
AFLP试剂盒TACSTD2 Others Human 人 OP2 / TACSTD2 人细胞裂解液 (阳性对照) 漆黄素Fisetin质量规格：HPLC≥95%,BR

山羊皮肤成纤维样细胞;DG-S1漆黄素（标准品）Fisetin质量规格：HPLC≥98%，标准品

PDCD1LG2 Others Mouse 小鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 人细胞裂解液 (阳性对照) 奇任醇(标准品)Kirenol质量规格：HPLC≥98%，标准品

HuTu-80 人十二指肠腺癌细胞千层纸素A(标准品)Oroxylin A质量规格：HPLC≥98%，标准品

WERI-Rb-1人视网膜神经胶质瘤细胞 WERI-Rb-1 human retinal glial cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS千金子二萜醇二乙酰苯甲酰酯（标准品）5,15-Diacetyl-3-benzoyllathyrol质量规格：HPLC≥98%，标准品
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。