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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
MCF-7/ER36细胞，人癌细胞 小鼠瘤β细胞(NOD/Lt转基因小鼠，SV40巨T抗原),NIT-1细胞 MDA-MB-231(ATCC来源), 人癌细胞敌草腈(标准品)质量规格：分析标准品Dichlobenil

MKN-28(人胃癌高转移细胞) 5×106cells/瓶×2乙二醇苯(标准品)质量规格：分析标准品,≥99.5%(GC)Ethylene glycol monophenyl ether

HUVEC Growth Medium 2pooled Pellet #N/A > 1 mio.cells 前脂肪细胞培养基PAM乙二醇苯(standard for GC,≥99.5%(GC))质量规格：standard for GC,≥99.5%(GC)Ethylene glycol monophenyl ether

CL-0399NCI-H295R(人肾上腺皮质腺癌细胞)5×106cells/瓶×2O-苄基-L-酪氨酸苄酯盐酸盐质量规格：0.985O-Benzyl-L-tyrosine benzyl ester

EPHA7 Others Rat 大鼠 EphA7 / EHK3 人细胞裂解液 (阳性对照) O-苄基-L-酪氨酸甲酯盐酸盐质量规格：0.985O-Benzyl-L-tyrosine methyl ester
P19细胞，畸胎癌细胞 人感染HCV肝癌细胞,HuH7-HCV细胞 CL-0224SW579(人甲状腺鳞癌细胞 )5×106cells/瓶×24,4'-二氨基二苯甲酮(>98.0%(T))4,4'-Diaminobenzophenone质量规格：>98.0%(T)

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-E14,4'-二氯二苯甲酮(>99.0%(GC))4,4'-Dichlorobenzophenone质量规格：>99.0%(GC)

FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,2-二琥珀酸(>99%,BR)2,2-Dimethylsuccinic acid质量规格：>99%,BR

肝实质细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)2,7-二羟基萘(>98%,BR)2,7-Dihydroxynaphthalene质量规格：>98%,BR

ADIPOQ Others Human 人 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 人细胞裂解液 (阳性对照) 2, 6-二氯醌-4-氯亚胺(>98%,BR)2,6-Dichloroquinone-4-chlorimide质量规格：>98%,BR
IMR-32(人神经母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×21,1'-二萘胺(>98.0%(HPLC)(N))质量规格：>98.0%(HPLC)(N)1,1'-Dinaphthylamine

Promocell C-21060 Airway Epithelial Cell GrowthMedium, 呼吸道上皮细胞生长培养基(即用型) 500ml2,2'-二萘胺(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)2,2'-Dinaphthylamine

人星形胶质细胞裂解物HAL1,2'-二萘胺(升华精制品)(>98.0%(HPLC)(N))质量规格：>98.0%(HPLC)(N)1,2'-Dinaphthylamine (purified by sublimation)

HBEGF Others Human 人 HBEGF / D 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)  N,N',N''-三苯基-1,3,5-苯三胺(>98.0%(HPLC)(T))质量规格：>98.0%(HPLC)(T)N,N',N''-Triphenyl-1,3,5-benzenetriamine

人结直肠腺癌细胞;SW620 [SW 620;SW-620]3-吲哚乙酸(IAA)质量规格：>98%,BR3-Indoleacetic acid
200bp DNA ladderCL-0377LLC-WRC 256(大鼠腹水癌细胞)5×106cells/瓶×2皮质甾酮(标准品)Corticosterone质量规格：HPLC>97.0%,标准品

mRTEC, 小鼠肾小管上皮细胞二硫化四乙基秋兰姆Disulfiram质量规格：>97%

人肺转化细胞;AE1201 人肝窦内皮细胞*培养基 100mL双硫仑(标准品)Disulfiram质量规格：HPLC>99%,标准品

人主动脉平滑肌细胞RNAHASMC miRNA5 μg杨梅素/杨梅酮Myricetin质量规格：HPLC>95.0%,BR

PTPRA Others Human 人 PTPRA / PTPalpha (aa 174-793) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 杨梅素/杨梅酮（标准品）Myricetin质量规格：HPLC>98.0%,标准品
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。