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异柠檬酸裂解酶(ICL)测试盒紫外分光光度法
参考价:

型号:

更新时间:2023-12-27  |  阅读:845

详情介绍

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:异柠檬酸裂解酶(ICL)测试盒紫外分光光度法

产品规格:50管/48样

检测方法:紫外分光光度法

产品货号:BK-01S6598

产品分类:乙醛酸循环系列
商品介绍:

测定意义:

ICLEC4.1.3.1)主要存在于植物和微生物中,油料作物种子在萌发过程中,通过乙醛酸循环及其他过程将脂肪转变成碳水化合物。ICL是乙醛酸循环的关键酶之一。

测定原理:

ICL催化异柠檬酸降解为乙醛酸和琥珀酸,乙醛酸和NADHLDH的作用下生成乙醇和NADNADH340nm下有特征吸收峰,监测340nm吸光度的减小速率可间接反应ICL活性。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

250mg 链霉蛋白 E Pronase E 4℃保存

50T 细小病毒B19 PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

10 g  Nicotinamide (Sirt1抑制剂) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

250mL Factor Xa Protease Digestion Buffer  Factor Xa Protease Digestion Buffer  常温保存

50mL 即用型封堵液(NC专用)  Southern Blocking Buffer (NC) -20℃保存

2 ug pIRES-neo2 pIRES-neo2 低温运输,-20℃保存

姬姆萨染色液  5ml*4

1瓶 LNcap cloneFGC(GFP)细胞株 LNcap cloneFGC(GFP) 低温运输和保存

营养琼脂(NA) Nutrient Agar 250g

150U 半乳糖氧化 Galactose Oxidase  -20℃保存

225ml生理盐水均质袋 Physiological Saline 10个/包

异柠檬酸裂解酶(ICL)测试盒紫外分光光度法C16orf48  16号染色体开放阅读框48抗体 规格: 0.2mlFBXL3  FBXL3蛋白抗体 规格: 0.2ml

HDAC8  组蛋白去乙酰化8抗体 规格: 0.2mlJMJD1B  组蛋白去甲基转移JMJD1B抗体 规格: 0.1ml

CD21/EBV receptor  2型补体受体抗体 规格: 0.1mlPhospho-MEK1/2(Ser222)  磷酸化丝裂原活化蛋白激激1/2抗体 规格: 0.1ml

Mouse Anti-human IgM/APC  APC标记的小鼠抗人IgM 规格: 0.1mlTIF1 beta/KAP1/TRIM28  转录中介因子Tif1β抗体 规格: 0.1ml

5-HT  5-羟色胺抗体 0.1mlBZW2  BZW2蛋白抗体 规格: 0.2ml

Phospho-Met(Tyr1349)  磷酸化肝细胞生因子受体(原基因)抗体 规格: 0.1mlDystrophin/DMD  肌营养不良蛋白 规格: 0.1ml

LSAMP  大脑边缘系统相关膜蛋白抗体 规格: 0.2mleIF3F  真核翻译起始因子3F抗体 规格: 0.1ml

UBL7  泛素样蛋白7抗体 规格: 0.2mlGTPBP10/Claudin12  紧密连接蛋白12抗体 规格: 0.2ml

LRCH3  富含亮重复家庭蛋白3抗体 规格: 0.2mlHtrA2/Omi  线粒体丝蛋白抗体 规格: 0.2ml

JMY  连接介导调节蛋白抗体 规格: 0.2mlMouse Anti-human IgG/Gold  胶体金标记的小鼠抗人IgG 规格: 2ml

JAK2  蛋白质酪激JAK2抗体 规格: 0.1mlSDH/Sorbitol Dehydrogenase  脱抗体 规格: 0.1ml

ST14/MTSP1  丝蛋白14/膜型丝蛋白1抗体 规格: 0.2mlTRAF3/CD40bp  瘤坏死因子受体相关蛋白3抗体 规格: 0.1ml 

 


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