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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
L W-3A(小鼠皮下结缔组织细胞) 5×106cells/瓶×2聚酰胺粉(柱层析用)质量规格：柱层析用Polyamide

AAV-293(人胚肾细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R027大鼠食管上皮细胞*培养基100mL 人羊膜细胞;WISH聚酰胺粉(柱层析用，200-400目)质量规格：柱层析用，200-400目Polyamide

CM-H111人成骨细胞*培养基100mL二亚砜(Standard for GC,≥99.95%(GC))质量规格：Standard for GC,≥99.95%(GC)Dimethyl sulfoxide

PDHA1 Others Human 人 PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 正癸醇(Standard for GC,≥99.5%(GC))质量规格：Standard for GC,≥99.5%(GC)n-Decyl alcohol

人肾上腺皮质细胞HACC琥珀酸二乙酯(standard for GC,≥99.6%(GC))质量规格：standard for GC,≥99.6%(GC)Diethyl succinate
Mo7e细胞，人巨细胞白血病细胞株 小鼠正常肝细胞,NCTC1469细胞 角腊上皮细胞生长添加物CEpiCGS五味子酚（标准品）schisanhenol  质量规格：HPLC≥98%，标准品

NCI-H226(人肺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2FMOC-3,5-二-L-酪氨酸FMoc-Tyr(3,5-I2)-OH质量规格：>98%,BR

BT-474(人导管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M085小鼠表皮角化细胞*培养基100mL 人Burkkit瘤细胞;Daudi10-脱乙酰巴卡亭(标准品)10-Deacetylbaccatin III质量规格：HPLC≥98%，标准品

非洲绿猴肾细胞系/IgRCD4+;VERO/IgRCD4+10-脱乙酰巴卡亭10-Deacetylbaccatin III质量规格：>98%,BR

DDR2 Others Rat 大鼠 DDR2 Kinase / CD167b 人细胞裂解液 (阳性对照) 维生素B1(标准品)vitamin B1质量规格：HPLC≥99%，标准品
EB病毒转化的人B细胞;KMYF 人关节软骨细胞*培养基 100mL25-去乙酰基利福喷汀质量规格：美国进口25-Desacetyl Rifapentin

上皮细胞生长添加物MEpiCGS利鲁唑-13C,15N2质量规格：美国进口Riluzole-13C,15N2

MAP2K6 Others Human 人 MKK6 / MEK6 / MAP2K6 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) N-羟基利鲁唑质量规格：美国进口N-Hydroxy Riluzole

人Butt瘤细胞;RAJI地拉罗司-d4质量规格：美国进口Deferasirox-d4

MFC细胞，胃癌细胞 绿色荧光蛋白标记人胃癌细胞,MGC803-GFP细胞 恒河猴胚肾细胞;FRhK-4 [FRhK4]N-去乙基舒尼替尼质量规格：美国进口N-Desethyl Sunitinib
游离DNA提取试剂盒U266细胞，人骨髓瘤细胞 串珠镰刀菌 人胚肾二倍体细胞;HEK-2尼罗替尼-d3Nilotinib-d3质量规格：美国进口

TE-11(人食管癌细胞) 5×106cells/瓶×27α-硫代螺内酯-d7 (主要的)7α-Thiomethyl Spironolactone-d7 (Major)质量规格：美国进口

HO-8910(人卵巢癌细胞) 5×106cells/瓶×2 mCF, 小鼠心脏成纤维细胞 人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293);APP-PS17α-硫代螺内酯7α-Thiomethyl Spironolactone质量规格：美国进口

人微血管内皮细胞裂解物HDMECL7α-硫代螺内酯7α-Thio Spironolactone质量规格：美国进口

PRSS27 Others Human 人 PRSS27 / Pancreasin / Marapsin 人细胞裂解液 (阳性对照) 6β-羟基-7α-(硫代) 螺内酯6β-Hydroxy-7α-(thiomethyl) Spironolactone质量规格：美国进口
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。