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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
IL5 Others Canine 狗 IL5 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2,3-二丙磺酸钠质量规格：>98% 2,3-dimercapto-1-propanesulfonate

CM-M009小鼠肺大静脉平滑肌细胞*培养基100mL硫酸铈铵质量规格：AR,>98%Ammonium ceric sulfate

UM-UC-3, 人膀胱移行细胞癌 小鼠成纤维细胞,3T3/e细胞 J774A1(单核细胞巨噬细胞)硫代乙酰胺质量规格：AR, ≥99.0%Thioacetamide

小鼠前胃癌细胞;MFC磺基罗丹明101质量规格：>97%Sulforhodamine 101; Sulforhodamine 640

PRMT5 Others Human 人 PRMT5 人细胞裂解液 (阳性对照) 金胺O（标准品）质量规格：检查AURAMINE O
MCF-7(MCF7)(ATCC来源), 人癌细胞 大鼠肝细胞瘤，H-4-II-E细胞 RAW 264.7(单核巨噬细胞白血病)环孢素D Cyclosporin D质量规格：>95%

人胰腺导管癌细胞;CFPAC-1帕比司他Panobinostat (LBH589, NVP-LBH589)质量规格：>98%,广谱HDAC抑制剂

GPC3 Others Human 人 Glypican-3 / GPC3 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,3-二（苄氧基)-5-氟尿嘧啶1,3-Di(benzyloxymethyl)-5-fluorouracil质量规格：美国进口

非洲绿猴肾细胞;VERO5-氟乳清酸水合物5-Fluoroorotic acid hydrate质量规格：美国进口

SEMA4D Others Rat 大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 人细胞裂解液 (阳性对照) 5-氟-1,3-二尿嘧啶5-Fluoro-1,3-dimethyluracil质量规格：美国进口
HCT 116人结肠癌细胞 HCT 116 human colon cancer cells MycCoy's 5A+10%FBSHISTOCHOICEMOUNTINGMEDIA封组织学级475MLRT

TNFSF11 Protein Human 重组人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 标签)玫瑰桃红　R BORDqcUX RqD 2828-33-3

人视网膜色素上皮细胞(HRPEpiC)(5×105 ) HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮细胞 HumanBOC-D-LeucineN-叔丁氧羰基-D-亮酸5克BR，98%

人肺巨细胞癌低转移细胞株;PG-LH7铟，英文名或英文缩写：Indium，级别：AR，98.5%，规格：100毫升

IFNA13 Others Mouse 小鼠 IFNA13 / Ierferon alpha-13 人细胞裂解液 (阳性对照) (烟酸
无内毒素质粒大提试剂盒HepG2/2-15细胞，人肝癌细胞 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞,RAW 264.7细胞 大耳山羊皮肤细胞;LDG-3木蝴蝶苷B（标准品）Oroxin B质量规格：HPLC≥98%，标准品

MCF-7(人癌细胞) 5×106cells/瓶×21霉素氨丁三醇Fosfomycin tromethamine质量规格：>98%,BR

Promocell C-22111 Endothelial Cell GrowthMedium 2 KIT, 内皮细胞生长培养基2型套装 500ml1霉素氨丁三醇(标准品)Fosfomycin tromethamine质量规格：含量测定

人成纤维母细胞-胎儿HDF-f木犀草苷(标准品)Cynaroside质量规格：HPLC≥98%，标准品

CDH15 Others Rat 大鼠 Cadherin-15 / CDH15 人细胞裂解液 (阳性对照) 木香烃内酯(标准品)Costundide质量规格：HPLC≥98%，标准品
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。