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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
Hep 3B(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2垂体腺苷酸环化酶激活肽-27，人，小鼠，绵羊，猪，大鼠PACAP-27 (human, mouse,ovine, porcine, rat)质量规格：>95%,BR

AGRP Others Human 人 AgRP 人细胞裂解液 (阳性对照) 垂体腺苷酸环化酶激活肽-27（6-27），人，鸡，小鼠，猪，大鼠PACAP-27 (6-27) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)质量规格：>95%,BR

人角膜上皮细胞HCEpiC垂体腺苷酸环化酶激活肽-38（16-38），人，鸡，小鼠，绵羊，猪，大鼠PACAP-38 (16-38) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)质量规格：>95%,BR

SECTM1 Others Human 人 SECTM1 / K12 人细胞裂解液 (阳性对照) 垂体腺苷酸环化酶激活肽相关肽（1-29），大鼠PACAP-Related Peptide (1-29)(rat)质量规格：>95%,BR

HMy2.CIR 人 B 母细胞胰多肽，人Pancreatic Polypeptide,human质量规格：>95%,BR
EGFL7 Protein Mouse 重组小鼠 EGFL7 / VE-statin 蛋白 (His 标签)醋酸艾塞那肽质量规格：度98%以上Exenatide Acetate/Exendin-4

TG-905(人脑胶质母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 心脏微血管内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)非那雄胺质量规格：>99%,BRFinasteride

大鼠海马神经元RN-h依诺沙星(水溶性）质量规格：依诺沙星含量≥60%Enoxacin

TAOK3 Others Human 人 TAOK3 / JIK / MAP3K18 (aa 1-411) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 氧氟沙星质量规格：>98.5%,BR,可用于细胞培养 Ofloxacin

SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-7氧氟沙星（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Ofloxacin
NRK-49F 大鼠正常肾成纤维细胞2′-脱氧肌苷-5′-单嶙酸二钠盐容量：RT1克

豹猫肺成纤维样细胞;LCL3DL-3-醇 3-Pyrrolidinol 40499-83-0

CNE1, 人鼻咽癌细胞系1，6-己二醇容量：100克

人纤维肉瘤细胞;HT-1080 大鼠肠平滑肌细胞*培养基 100mLMaltose饴糖100U高，98%

脑静脉血管内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)叔丁基tert-Butylmetxyl
膜蛋白提取试剂盒CSF3 Protein Human 重组人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b)硫酸长春新碱/硫酸醛基长春碱(标准品)Vincristine Sulfate质量规格：HPLC≥98%，标准品

THP-1(人髓系白血病单核细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠成肌细胞;C2C12帕唑帕尼Pazopanib质量规格：>99%,BR

人小梁网细胞裂解物HTMCL非洛地平/非氯地平Felodipine质量规格：>98%,USP30,BR

AMICA1 Others Mouse 小鼠 AMICA1 / JAML 人细胞裂解液 (阳性对照) 非洛地平(标准品)Felodipine质量规格：>98%,标准品用于含量测定

小鼠胚胎成纤维细胞;PA3176-硫鸟嘌呤(进分)6-TG/Thioguanine质量规格：>98%,进分,Sigma A4882
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。