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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Brisbane/60/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 苯甲酰基十字孢碱(PKC-412)质量规格：≥96%,美国进口Midostaurin

A431 人表皮癌细胞无水邻菲啰啉；1,10-菲罗啉质量规格：AR,>99%1,10 –Phenanthroline anhydrous

PLC/PRF/5人肝癌亚力山大细胞 PLC/PRF/5 human hepatoma cell Alexander MEM培养基(GIBCO)+10%FBS邻菲啰啉一水；1,10-菲罗啉一水质量规格：AR,>99%1,10-Phenanthroline hydrate

RSPO3 Protein Human 重组人 RSPO3 / R-spondin 3 蛋白 (aa 1-146, His 标签)邻菲啰啉盐酸盐一水；1,10-菲罗啉盐酸盐质量规格：AR,>99%1,10-Phenanthroline   monohydrate

人骨骼肌细胞 (HSkMC)( 5×105 ) mRTEC, 小鼠肾小管上皮细胞 Mouse酮色林,凯他色林(标准品)质量规格：HPLC>98%,标准品Ketanserin
肺成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)硫酸氢氯吡格雷 II型质量规格：含量97.0%-101.5%，II型Clopidogrel Bisulfate

CCRF-CEM细胞，人急性细胞白血病T细胞 小鼠白血病细胞,C3细胞 人肝窦内皮细胞cDNAHHSEC cDNA萘丁美酮/萘普酮质量规格：>99%Nabumetone

PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2盐酸洛哌丁胺(标准品)质量规格：HPLC>99%,标准品Loperamide HCl

CT26.WT(小鼠结肠癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0198RM-1(小鼠前列腺癌细胞)5×106cells/瓶×2 人APP基因转染CHO细胞株;7WD10酮咯酸氨丁三醇质量规格：>98.5%,USP,BRKetorolac Tromethamine

大鼠肝细胞;BRL 3A酮咯酸氨丁三醇（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Ketorolac Tromethamine
RLF, 大鼠成纤维细胞 STJ.EPI.H7细胞 COS-1(SV40 转化的非洲绿猴肾细胞)S-(+)-2-基-4--1-，英文名或英文缩写：L-Leucinol，级别：BR，98%，规格：5克

人结直肠腺癌细胞;HCT 116 [HCT116]3，5-二基异坐，97% 3,5-Dimqthylisoxczolq 300-87-8

REG1A Others Human 人 REG1A / PSPS 人细胞裂解液 (阳性对照) PHOSPHATEBUFFEREDSALINE(PBS)20XCONCENTRATE,pH7.5PBS溶液超级透明无混浊液体RTsigma

人脑微血管内皮细胞总RNAHBMEC NA脲酶，英文名或英文缩写：Urease(jack bean)，级别：BR，RZ～3,≥250u/mg，规格：25克

KYNU Others Mouse 小鼠 KYNU / Kynureninase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) -基本酚2-Aminopxenol
PVDF膜0.22μm正常大鼠肾细胞;NRK硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸1酸钠盐Thionicotinamide adenine dinucleotidephosphate  salt质量规格：美国进口

Panc 10.05细胞，人胰腺腺癌细胞 人舌鳞癌细胞系,TSCCA细胞 大鼠脑胶质瘤细胞;C6烟酸腺嘌呤二核苷1酸钠盐Nicotinic acid adenine dinucleotide phosphate  salt质量规格：美国进口

JeKo-1(人套细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2烟酸腺嘌呤二核苷酸钠盐Nicotinic acid adenine dinucleotide  salt质量规格：美国进口

Promocell C-25020 Hepatocyte Maienance Medium, 肝细胞维持培养液 500mlα-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸α-Nicotinamide adenine dinucleotide质量规格：美国进口

人胃腺癌细胞;SGC-7901 [SGC7901]NAD+, 锂盐NAD+, Lithium Salt质量规格：美国进口
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。