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产品名称 | 荧光及显色法,细胞样本 |
检测方法 | 详见说明 |
规格 | 50T |
货号 | BK-S64133 |
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
ESM1 Others Human 人 ESM1 / Endocan 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 苯磺酸氨氯地平(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Amlodipine Besylate
人脐静脉平滑肌细胞HUVSMC盐酸阿莫罗芬/盐酸阿莫洛芬 质量规格:≥99,BRAmorolfine
EB病毒转化的绒猴细胞;B95-8 膀胱癌细胞,J82细胞 GBC-SD(胆囊癌细胞)氟米质量规格:>99%,BRFlumethasone
EB病毒转化的人B细胞;HH-29氟米(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Flumethasone
SCARB2 Others Mouse 小鼠 SCARB2 / LIMP2 / CD36L2 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸利托君质量规格:>98%,BRRitodrine HCl
草鱼肾细胞;GIK顺铂(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Cisplatin
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 克拉曲滨,克拉利宾质量规格:>99.0%,USP34,BR,可用于细胞培养Cladribine
CL-0262BE(2)-M17(人神经母细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2西地尼布马来酸盐质量规格:度> 99%Cediranib Maleate
HCC细胞,高分化鳞癌细胞 人T瘤细胞Jurkat亚系,Jurkat77细胞 人癌细胞;MDA-MB-157西他列汀质量规格:>98.5%,BRSitagliptin
786-O(人肾透明细胞癌细胞) 5×106cells/瓶×2维达列汀;维格列汀质量规格:>98.5%,BRVildagliptin
CL-0091HBL-100(人整合SV40基因的上皮细胞)5×106cells/瓶×2补骨脂素(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Psoralen
小鼠骨髓细胞;FDC-P1 大鼠视网膜神经节细胞*培养基 100mL苍术素(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Atractylodin
PATU-8988/FU 人胰腺癌尿嘧啶耐药草乌甲素(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Bulleyaconitine A
SEMA6A Others Human 人 Semaphorin-6A / SEMA6A 人细胞裂解液 (阳性对照) 草质素(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Herbacetin
团头鲂尾鳍细胞;WCF丙谷胺(标准品)质量规格:含量测定Proglumide
荧光及显色法,细胞样本人肾皮质上皮细胞RNAHRCEpiC miRNA5 μg拉莫三嗪 (标准品)Lamotrigine质量规格:HPLC>98%,标准品
LILRA3 Others Human 人 ILT6 / LILRA3 人细胞裂解液 (阳性对照) D-半乳糖醛酸D-Galacturonic acid质量规格:进分,97%,一水
新生牛眼Tenon's囊成纤维细胞;NBTFD-半乳糖醛酸(标准品)D-Galacturonic acid质量规格:UV法含量测定;一水物
HCT-15细胞,人结直肠腺癌细胞 人眼脉络色素瘤细胞,OCM-1细胞 人结直肠腺癌细胞;LoVo骨化三醇Calcitriol质量规格:度≥98%,BR
Hepa 1-6(小鼠肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2坎地沙坦酯Candesartan cilexetil质量规格:>99%,BR,可用于细胞培养
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加*。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。