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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
CSC, 小鼠心肌细胞 人小肠颈部表皮样癌细胞，Ca Ski细胞 F81(猫肾细胞)甘丙肽(1-13)-神经肽Y(25-36)酰胺(M32)质量规格：>95%,BRGalanin (1-13)-Neuropeptide Y(25-36), amide (M32)

人导管瘤细胞;UACC812甘丙肽信号关联肽（1-41）酰胺；Preprogalanin(65-105)酰胺质量规格：>95%,BRGalanin Message Associated Peptide (1-41), amide; Preprogalanin(65-105), amide

ICAM1 Others Mouse 小鼠 ICAM-1 / CD54 人细胞裂解液 (阳性对照) 胃泌素Ⅰ（1-14），人质量规格：>95%,BRGastrin I (1-14) (human)

小鼠间充质干细胞-骨髓MMSC-bm胃泌素释放肽，人质量规格：>95%,BRGastrin Releasing Peptide,human

CSF1 Others Human 人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 甘氨脱氧胆酸钠(进分)质量规格：>97%,进分,Sigma G9910 glycodeoxycholate
tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);F9-CAG-tTA-3E5偶氮胂 I质量规格：ARArsenazo I

人神经细胞(HN) (10×106 )碱性品红(生物染色级)质量规格：BS(生物染色级)Basic Fuchsin

膀胱上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)酸性蓝40(>50%,BS)质量规格：>50%,BSAcid blue 40

人上皮细胞;Ca Ski 大鼠肠巨噬细胞*培养基 100mL酸性品红6B(>50%,BS)质量规格：>50%,BSAcid Red 6B

EL4 小鼠瘤细胞B1(>98%,BR)质量规格：>98%,BRAflatoxin B1 from Aspergillus flavus
Promocell C-28040 Pericyte Growth Medium, 周细胞生长培养基 500ml植物琼脂容量：RT支

人成纤维细胞;HFF5-羌基-DL-色安醋(+4°C) 5-xy7noxytryptophcn 26-69-9

TGFBR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 TGFBR2 人细胞裂解液 (阳性对照) 银粉容量：500克

F344大鼠骨髓间质干细胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cells马脾铁蛋白容量：25克

NW38细胞，人色素瘤细胞 鼠李糖乳杆菌 人神经胶质细胞瘤细胞;U251PVP-360 100g/250g/500g/5kg原装 Sigma PVP360
视黄醇结合蛋白RBP试剂盒人侵袭性脉络膜色素瘤细胞;MuM-2B胶原酶I型(sigma)Collagenase, Type1质量规格：≥125 CDU/mg ,Sigma分装

CD164 Others Rat 大鼠 CD164 / Endolyn 人细胞裂解液 (阳性对照) 胶原酶II型(sigma)Collagenase, Type2质量规格：≥125 CDU/mg ,Sigma分装

胎儿骨髓间质干细胞 Fetal bone marrow mesenchymal stem cells胶原酶IV型(sigma)Collagenase, TypeIV质量规格：≥160 CDU/mg,Sigma分装

SHG-44细胞，神经胶质瘤细胞 霉 人内皮细胞RNAHLEC miRNA5 μg钼酸钠二水(AR) molybdate质量规格：>99%,AR

SC-1(小鼠胚胎细胞) 5×106cells/瓶×2硅酸镁（高）Magnesium silicate质量规格：>98%
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。