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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
COLEC12 Others Cynomolgus 食蟹猴 CLP1 / COLEC12 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 甲霜灵标准溶液(10μg/ml,u=6%)质量规格：10μg/ml,u=6%Metalaxyl solution

人食道上皮细胞HEEpiC氯草定(标准品)质量规格：分析标准品Nitrapyrin

非洲绿猴肾细胞系/HCV-C;Vero-HCV-C 人膀胱癌细胞，5637细胞 BEL-7402(肝癌细胞)丁二酮1(镍试剂)质量规格：ARDimethylglyoxime

人癌细胞;MDA-MB-453黄酮质量规格：>98%,进分Flavone

GFRA2 Others Human 人 GFRA2 / GFRα2 / GDNFRB 人细胞裂解液 (阳性对照) 依维菌素质量规格：>95%,BRIvermectin
TNFa转染耐VP16绒癌细胞;JEG-3-VP16-TNFa乙基曙红(>95%,BS)质量规格：>95%,BSEthyl eosin

FIGF Others Rat 大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 人细胞裂解液 (阳性对照) 没食子酸乙酯质量规格：>98%,BREthyl gallate

脂肪间质干细胞 Adult adipose derived mesenchymal stem cells四螨嗪(标准品)质量规格：分析标准品,98.6%Clofentezine

SW038-C2细胞，人脑胶质母细胞瘤细胞 致病性大肠埃希氏菌 人间充质干细胞-脂肪RNAHMSC-ad miRNA5 μg四螨嗪标准溶液(100μg/ml,u=4%)质量规格：100μg/ml,u=4%Clofentezine solution

SK-NEP-1(人肾母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2四螨嗪标准溶液(10μg/ml,u=6%)质量规格：10μg/ml,u=6%Clofentezine solution
大鼠肾小管平滑肌细胞*培养基 100mLNHS-biotin;生物素琥珀酯 质量规格：>98%,BRNHS-biotin

C6大鼠胶质瘤细胞 C6 rat glioma cell DMEM+10% FBS雷贝拉唑钠(标准品)质量规格：HPLC≥98%,标准品Rebeprazole

NOV Protein Human 重组人 CCN3 / NOV 蛋白 (His 标签)雷贝拉唑钠质量规格：≥98%,BRRebeprazole

Hela 299(人细胞) 5×106cells/瓶×2 上皮细胞培养基-2EpiCM-2头孢克1质量规格：>98%,BRCefixime

软骨细胞生长添加物CGSNDSB 256(>98%,BR)质量规格：>98%,BRNDSB 256
α-L-岩藻糖苷酶AFU试剂盒人前脂肪细胞-皮下cDNAHPA-s cDNA碱式乙酸铝(>50%,BR)Aluminum acetate, basic质量规格：>50%,BR

小鼠心肌细胞(MCM)(1×106)氟化铝三水(>98%,BR)Aluminum fluoride trihydrate质量规格：>98%,BR

正常大鼠肾细胞;NRK-52E酸性氧化铝(>90%,BC)Aluminum oxide, active质量规格：Al2O3>90%,BC

杂交瘤(B类);Z1510A2G6A2F8 小鼠角膜成纤维细胞*培养基 100mL碱性氧化铝(>90%,BC)Aluminum oxide, active质量规格：Al2O3>90%,BC

HUM, 正常人主动脉平滑肌细胞 Human硫酸铝钾十二水(>99%,BR)Aluminum potassium sulfate docecahydrate质量规格：>99%,BR
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。