型号：
更新时间：2023-12-26 | 阅读：599
详情介绍
商品介绍：
测定意义: 淀粉磷酸化酶（Starch Phosphorylase，SP）是淀粉代谢过程的可逆反应酶，既可催化淀粉的合成，也可催化淀粉的分解。 在高等植物中，淀粉磷酸化酶（合成方向）主要存在于质体中，负责延长淀粉的 α-1,4-葡萄糖链的非还原末端；淀粉磷酸化酶（分解方向）主要存在于细胞质基质中，催化淀粉中的α-1,4-糖苷键磷酸解产生葡萄糖-1-磷酸，负责葡萄糖链的磷酸解，是淀粉代谢过程中的关键酶。 在植物体中，淀粉磷酸化酶分解方向的底物无机磷浓度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸浓度几乎高了两个数量级，一般认为淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解，因此，分解方向的淀粉磷酸化酶具有重要测定意义。 测定原理： 淀粉磷酸化酶催化淀粉中的α-1,4-糖苷键与无机磷反应产生葡萄糖-1-磷酸，葡萄糖-1-磷酸在磷酸葡萄糖变位酶的作用下产生葡萄糖-6-磷酸，并在6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化下还原NADP+产生NADPH，使340nm下吸光值增加。 需自备的仪器和用品： 紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
提取液：液体 100 mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体 15 mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体 3 mL×1 瓶，4℃保存。
试剂四：液体 3 mL×1 瓶，4℃保存。
本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
淀粉磷酸化酶(SP)测试盒微量法 | 100管/96样 | 微量法 | BK-01S6693 |
实验结果判断我有妙招：
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3、以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性，P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑，P／N小于1．5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照，与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求：
① 易挥发、低燃点的试剂要密封，放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气，水发生反应的物质要密封，并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂，应将其固体或晶体密封保存，不宜长期存放其水溶液，亚硫酸，氢硫酸溶液要密封存放，钾，钠，白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存，其相应的溶液较固体更易反应，所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封，放于阴凉通风处保存。
操作步骤：
1. 样品的准备：
a. 细胞样品的准备：收集细胞，用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心，取上清作为待测样品。
b. 组织样品的准备：动物用生理盐水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心，取上清作为待测样品。
d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒（P1511）测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大，该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。
e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量，用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如，小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定，可以冰浴保存；如果当天不能完成测定，可以-70 ℃冻存，但建议尽量当天完成测定。
2. 试剂盒的准备工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 参照下表，根据待检测样品(包括标准品) 数量，配制适量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可当天使用，但建议尽量现配现用。
注意：由于酶溶液的用量较少且易沉降，必须注意在使用前先轻轻离心一下，然后适当混匀后再使用。
b. 反应启动工作液配制：将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀，按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释，即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存，可当天使用，但建议尽量现配现用。
c. (可选做) SOD 标准品准备：需自备SOD标准品，用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升，参考样品进行检测。说明：为避免稀释后SOD酶活性的下降， SOD标准品宜现稀释现使用；本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品，但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。
1g 苯 Phenylmethyl Sulfonyl Fluoride（PMSF） 室温保存
改良Camp-BAP氏琼脂添加剂B Modified Camp-BAP Agar additive B 1ml*5
100uL 万VanA抗性基因PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存
2 ug pMET C pMET C 低温运输，-20℃保存
原材料系列
1瓶 SH-SY5Y细胞株 SH-SY5Y 低温运输和保存
改良Giolitti-Cantobi肉汤 Modified Giolitti-Cantoni Broth 250g
10mg 5- 氟 -5’- 脱氧尿苷 5’dFUrd (5-Fluoro-5’Deoxyuridine) 室温保存
50T 大豆内源基因PCR检测试剂盒 低温运输，-20℃保存
10次 一步式PAGE染液 One-Step PAGESTAIN 4℃保存
50T 呼吸道合胞病毒A组PCR检测试剂盒 低温运输，-20℃保存
淀粉磷酸化酶(SP)测试盒微量法Gax 生终止特异性同源盒基因抗体 规格: 0.2mlC17orf82 17号染色体开放阅读框82抗体 规格: 0.2ml
HSPA6 热休克蛋白70家族蛋白6抗体 规格: 0.2mlDonkey Anti-Guinea pig IgG/Cy5 Cy5标记的驴抗豚鼠IgG 规格: 0.1ml
Rabbit Anti-Mink IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的兔抗水貂IgG 规格: 0.1mlTransketolase(CT) 转酮醇(转羟乙醛)抗体（C端） 规格: 1ml
Ube2L3 泛素蛋白连接L3抗体 规格: 0.2mlCLLD7 核苷酸交换因子CLLD7抗体 规格: 0.2ml
MAGP2 纤微丝相关糖蛋白2抗体 规格: 0.1mlFrizzled 2 Wnt信号受体FZD2蛋白抗体 规格: 0.1ml
PNPT1 多核苷酸磷酸化蛋白抗体 规格: 0.2ml
IL12RB2 白细胞介素-12受体β2抗体 规格: 0.1ml
E2 tag E2 tag标签抗体 规格: 0.1ml
CDC4/FBW7/SEL10 瘤抑制因子FBW7抗体 规格: 0.2ml
CEBP-alpha 转录调节因子C/EBP α 抗体 规格: 0.1ml
Mouse Anti-Guinea pig IgG/Cy3 Cy3标记的小鼠抗豚鼠IgG 规格: 0.1ml
BEX4 脑表达X连锁蛋白4抗体 规格: 0.2ml
关闭
电话
询价
