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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
CL-0321BEL-7405(人肝癌细胞)5×106cells/瓶×2尿苷；尿嘧啶核苷质量规格：>99%,BR，可用于细胞培养Uridine

MANF Others Mouse 小鼠 MANF / ARMET 人细胞裂解液 (阳性对照) 尿嘧啶核苷,尿苷(标准品)质量规格：HPLC>98%,标准品Uridine

小鼠肺大静脉内皮细胞*培养基 100mLUTP;5‘-三1酸尿苷三钠质量规格：>98%,BRUTP, Tri Salt

LLC1[LL/2]小鼠Lewis肺癌细胞 LLC1[LL/2] mice with Lewis lung cancer cells 1640+10% FBSFmoc-N'-三苯-L-赖氨酸质量规格：0.98Fmoc-Lys(Mtt)-OH

IL1B Protein Human 重组人 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 标签)芴甲氧羰基-O-苄基-L-苏氨酸质量规格：0.98Fmoc-Thr(Bzl)-OH
hMo-PB-c single donorpre-screened 外周血来源的人类单核细胞，单一来源，预选型 10 million 人绒毛间充质成纤维细胞HVMF化铯(用于高通量质谱,99.9995%)质量规格：分析标准品，用于高通量质谱,99.9995%Cesium iodide

MDA-MB-231(ATCC来源), 人癌细胞1,3-二-2-咪唑啉酮(用于GC-HS,≥99.8%(GC))质量规格：用于GC-HS,≥99.8%(GC)1,3-Dimethyl-2-imidazolidinone

GPC3 Others Mouse 小鼠 Glypican 3 / GPC3 / OCI-5 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 甲地孕酮(标准品)质量规格：HPLC>98%,标准品Megestrol base

人正常前列腺上皮细胞;RWPE-13-缩酮质量规格：>99%,BREstradiene dione-3-keta

狗肾细胞隆突型;MDCK superdome T细胞，CTLL-2细胞 RTE细胞，大鼠气管上皮细胞索拉非尼质量规格：>95%,BR,可用于细胞培养Sorafenib base
ITGA5&ITGB6 Others Human 人 ITGA5 & ITGB6 Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-溴蒽(>97.0%(GC))质量规格：>97.0%(GC)2-Bromoanthracene

CL-0465WERI-Rb-1(人视网膜神经胶质瘤细胞)5×106cells/瓶×29,10-双(二乙基膦)蒽(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)9,10-Bis(diethylphosphonomethyl)anthracene

BRL细胞，肝细胞 人前列腺癌细胞,9L-E细胞 人上皮细胞RNAHMEpiC miRNA5 μg9-溴蒽(>99.0%(GC)(HPLC))质量规格：>99.0%(GC)(HPLC)9-Bromoanthracene

猕猴肌肉细胞;MMm72-溴-9,10-二苯基蒽(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)2-Bromo-9,10-diphenylanthracene

ENG Others Human 人 Endoglin / CD105 / ENG 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-溴-4-正辛基苯(>99.0%(GC)(T))质量规格：>99.0%(GC)(T)trans-4-Butylcyclohexanecarboxylic Acid
硫氧还蛋白氧化还原酶TrxR测试盒人脐静脉内皮细胞(HVVEC)( 5×105 ) SK-MEL-1, 人皮肤色素瘤细胞 Human核黄素1酸钠混合物（标准品）Riboflavin-5-phosphate 质量规格：供HPLC法系统适用性试验

人胚胎心肌组织来源细胞;CCC-HEH-2麦芽糖（标准品）D-(+)-Maltose monohydrate 质量规格：HPLC>98%,标准品

IL17A Others Human 人 IL17 / IL17A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 尿素（标准品）Urea质量规格：含量测定

CL-0285L-O2(人正常肝细胞)5×106cells/瓶×2生物素（标准品）D-Biotin质量规格：HPLC法含量测定

hDPSCs, 人前磨牙牙髓干细胞 小鼠胚胎成纤维细胞，3T6swiss细胞 Hs 1.Tes(正常人细胞)特非那定（标准品）Terfenadine质量规格：含量测定
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。