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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
CL-0267CNE-2Z(人鼻咽癌细胞)5×106cells/瓶×2DL-正缬氨酸质量规格：0.99DL-Norvaline

PPT1 Others Human 人 PPT1 / Palmitoyl-protein thioesterase 1 人细胞裂解液 (阳性对照) DL-焦谷氨酸质量规格：0.98DL-Pyroglutamic acid

人主动脉内皮细胞cDNAHAEC cDNADL-叔亮氨酸质量规格：>98%,BRDL-tert-Leucine

猪肾传代细胞;IBRS-2 人B母细胞，HMy2.CIR细胞 LⅡ细胞，KM小鼠网织细胞肉瘤瘤株DL-丙氨酰-DL-正缬氨酸质量规格：0.99DL-Alanyl-DL-norvaline

稳定表达EBNA1的人胚肾细胞;293E3-(1-萘基)-L-丙氨酸质量规格：>98%,BR3-(1-Naphthyl)-L-alanine
AGT Others Human 人 AGT / SerpinA8 人细胞裂解液 (阳性对照) 多1紫杉醇无水/多西他赛（标准品）质量规格：HPLC>99%,标准品Docetaxel anhydrous

KM小鼠子瘤株;U27多1紫杉醇三水合物质量规格：含量>99.0%Docetaxel trihydrate

IL1R2 Others Canine 狗 IL1R2 / IL1RB 人细胞裂解液 (阳性对照) 莫索尼定质量规格：度>99%,BR,可用于细胞培养Moxonidine

CaEs-17, 人食管癌细胞株莫索尼定(标准品)质量规格：HPLC>98%,标准品Moxonidine

SK-HEL-1细胞，皮肤色素瘤细胞 人鳞癌细胞(高分化),HCC 94细胞 人支气管上皮细胞总RNAHBEpiC NA奈帕芬胺质量规格：>99%,BRNepafenac
RSV-G Others Respiratory syncytial virus/RSV 人类呼吸道合胞病毒 hRSV (A, rsb1734) glycoprotein G / RSV-G 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 茜素质量规格：HPLC≥98%，标准品Alizarin

小鼠肥大细胞瘤细胞;P815姜黄素质量规格：姜黄素类化合物>95%,姜黄素>75%,去甲氧基姜黄素<20%Curcumin

KB细胞，口腔表皮样癌细胞 人食管癌细胞,KYSE510细胞 家猫肾细胞;CATK1姜黄素（标准品）质量规格：HPLC≥98%,标准品Curcumin

tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);F9-CAG-tTA-3E5姜黄素（高）质量规格：HPLC≥97%,BRCurcumin

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) (Z)-4-羟基它莫西芬质量规格：美国进口(Z)-4-Hydroxytamoxifen
双试剂直接法分光光度计HSC-T6(大鼠肝星形细胞) 5×106cells/瓶×2 hDPSCs, 人前磨牙牙髓干细胞 人原胚肾转化细胞;293 Ad5海带多糖；昆布糖 (来自褐藻类)Laminarin from Laminaria digitata质量规格：BR，日本进口分装

人胚胎膀胱组织来源细胞;CCC-HB-2胰酶(1:250)，胰酶粉Pancreatin质量规格：酶活1:250,BR

人小气管上皮细胞(HSAEpiC)(5×105 )木瓜蛋白酶(800u/mg)Papain质量规格：800u/mg

CL-0287M14(人色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2木瓜蛋白酶(2000u/mg)Papain质量规格：2000u/mg;200万u/g

人侵袭性脉络膜色素瘤细胞;MuM-2C 大鼠内脏脂肪细胞*培养基 100mL胰酶(1:2500)Pancreatin质量规格：酶活1:2500,BR
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。