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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
CASK Others Human 人 CASK Kinase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 环丙沙星-d8盐酸盐质量规格：美国进口Ciprofloxacin-d8,

角膜内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)盐酸环丙沙星质量规格：美国进口Ciprofloxacin HCl

小鼠骨髓间充质干细胞(EGFP标记) 人肺腺癌细胞，SW 1271[SW-1271;SW1271]细胞 LLC Lewis(肺癌细胞)去乙酰泛昔洛韦质量规格：美国进口Desacetyl Famciclovir

人神经母细胞瘤细胞;BE(2)-M176-去氧喷昔洛韦质量规格：美国进口6-Deoxypenciclovir

TIMD4 Others Mouse 小鼠 TIMD4 / TIM4 人细胞裂解液 (阳性对照) 脱水长春碱（标准品）质量规格：HPLC≥95%，标准品Anhydrovinblastine
小鼠神经母细胞瘤细胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]盐酸氨基脲质量规格：>98%,BRAminourea

HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Florida/4/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 硫酸链霉素灭菌溶液，30 mg/ml质量规格：Sterile灭菌溶液,30mg/mlStreptomycin sulfate solution, 30 mg/ml

EB病毒转化的人B细胞;KM932硫代硫酸铵质量规格：>99%,BRAmmonium thiosulfate

6. 肠胃细胞系统盐酸氨丙啉(>99%,BP)质量规格：>99%,BPAmprolium

CL-0398NCI-H2452(人间皮瘤细胞)5×106cells/瓶×2三氧化二锑(>98%,BR)质量规格：>98%,BRAntimony (III) oxide
A172细胞，人胶质母细胞瘤细胞 桔青霉 人表皮色素细胞-深色素RNAHEM-d miRNA5 μg特级胎牛血清容量：RT，避光1克

RWPE-2(人前列腺正常细胞) 5×106cells/瓶×2录坐西林内 Cloxccillin wo7ium 7081-44-9

HBZY-1(大鼠肾小球系膜细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0369IR983F(大鼠骨髓瘤细胞)5×106cells/瓶×2 SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-1天青I;亚天青;蔚蓝I czurq I;czurI(GiqMsc) 231-22-2

人尿道上皮细胞RNAHUC miRNA5 μg3-甲氧基酚500克

FLT3LG Others Mouse 小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 人细胞裂解液 (阳性对照) 崩溃酶(+4℃)NA
微球菌粉EFNB2 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 标签)二乙二醇(标准品)Diethylene glycol质量规格：分析标准品

COLO 201(人结直肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 膀胱平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)二乙二醇(Standard for GC,≥99.5%(GC))Diethylene glycol质量规格：Standard for GC,≥99.5%(GC)

人内根壳细胞cDNAHHIRSC cDNA十二醇(标准品)1-Dodecanol质量规格：Standard for GC,>99%(GC)

CLEC3B Others Human 人 CLEC3B / Teanectin 人细胞裂解液 (阳性对照) 直接蓝6(标准品)DIRECT BLUE 6质量规格：分析标准品

A9 小鼠皮下结缔组织细胞分散橙37(标准品)Disperse Orange 37质量规格：分析标准品
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。