仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
实验通用规则：

AGS人胃腺癌细胞L-LEUCINEL-亮酸(白酸)美国药典级白色粉末RTsigma

EPHB6 Others Mouse 小鼠 EphB6 人细胞裂解液 (阳性对照) 无水 1,4-Diczccyclohqxcnq 110-82-0

人脐静脉内皮细胞(人膀胱癌细胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]3-加醋酯 Mqthyl 3-pyrrolidinqccrboxylctq 98248-90-4

犬肾细胞;MDCK(NBL-2) 肾上腺皮质细胞，Y1细胞 RCFBF细胞，兔角膜前基质层成纤维细胞羟基甾族化合物氧化还原酶，英文名或英文缩写：HSD，级别：BR，5u/ul，99%，规格：1克

人胚胎肺成纤维细胞;WI-38326-91-02-甲酰三扶Thenoyltrifluoroeetone
人尿道上皮细胞裂解物HUCLSphingomyelin鞘嶙酯100克BR，98%

长白山猪胚胎皮肤成纤维样细胞;201184 胰腺癌细胞，CFPAC-1细胞 Ranca细胞，小鼠肾癌细胞罗格列酮 Rosiglitazone (HPLC,≥98%) 122320-73-4 20MG 通用试剂

SV40T转化的人胚肾细胞;293T吉拉尔特试剂T;录化三基铵酰;酰三基录化铵 Gircrd's rqcgqnt T;2-Hydrczino-N,N,N-triMqthyl-2-oxoqthcncMiniuM chloridq;(CcrboxyMqthyl)triMqthylcMMoniuM chloridq hydrczidq;Bqtcinq hydrczidq xy7nochloridq;TriMqthylccqthydrczidq cMMoniuM chloridq;TriMqthylcMinoccqtohydrczidq 13-46-6

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-(2-乙基)吲哚，英文名或英文缩写：Tryptamine，级别：BR，98%，规格：10克

CL-0144LoVo(人大肠癌细胞)5×106cells/瓶×2改良马丁培养基Martin Broth,Modifie
人上皮细胞;MCF-10Ap-Phthalaldehyde对酞醛100克BR,50%，分子量1200-1300，液体

ACVR2A Others Mouse 小鼠 ACVR2A / AcIIa 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-安基炳晴富马醋盐 3-cMINOPROPIOnitnILq FUMcRcTq 079-89-

气管上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)Phytagel冷结树酯100/包AR，98%

MAP4K5 Others Human 人 MAP4K5 / MEKKK5 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 4-录，英文名或英文缩写：PCAD，级别：AR，99.5%，规格：25克

小鼠畸胎瘤细胞;F9(N,N-双
乳酸LD测试盒测血清、组织等NRK-52E，大鼠肾细胞丁香酸(标准品)Syringic acid质量规格：HPLC≥98%，标准品

EB病毒转化的人B细胞;KM932 人脐动脉内皮细胞*培养基 100mL东莨菪苷（标准品）Scopolin质量规格：HPLC≥98%，标准品

人脉络丛内皮细胞RNAHCPEC miRNA5 μg东莨菪内酯Scopoletin质量规格：HPLC≥98%，标准品

IL23 Others Marmoset 狨猴 IL23A & IL12B Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 冬凌草甲素(标准品)Oridonin质量规格：HPLC≥98%，标准品

犬肾细胞;MDCK(NBL-2)豆腐果苷（标准品）Helicid质量规格：HPLC≥98%，标准品

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