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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
ACVR2A Others Mouse 小鼠 ACVR2A / AcIIa 人细胞裂解液 (阳性对照) 百里酚酞氨羧络合剂质量规格：螯合剂Thymolphthalein Complexon

CM-M008小鼠支气管成纤维细胞*培养基100mL钙黄绿素蓝(>98.0%(T))质量规格：>98.0%(T)Calcein Blue

NPDC1 Others Human 人 NPDC-1 / NPDC1 人细胞裂解液 (阳性对照) 肌激酶(比活性：>200 U/mg,BC)质量规格：比活性：>200 U/mg,BCMyokinase

上皮细胞培养基EpiCM1酸二酯酶 II质量规格：比活度：>1.2 U/mg,BCPhosphodiesterase II from Bovine Spleen

SW 1271[SW-1271;SW1271]细胞，人肺腺癌细胞 人肾透明细胞癌皮肤转移细胞,Caki-1细胞 人表皮色素细胞-HEM-a丁二(>98%，BR)质量规格：>98%，BRSuccinimide
CL-0132KG-1(人急性骨髓性白血病细胞)5×106cells/瓶×2壳聚糖，英文名或英文缩写：Chitosan，级别：高 ，98%，规格：1UN

TNFRSF14 Others Cynomolgus 食蟹猴 HVEM / TNFRSF14 人细胞裂解液 (阳性对照) 醋铈 CqRIUM(III) cCqTcTq SqSQUIHYDRcTq, 99.9% (RqO) 237-00-8

人气管上皮细胞裂解物HTEpiCLpotewwiumACETATE,ANxy7noUS钾美国药典级RTsigma

Sw626细胞，人卵巢癌细胞 鲑鱼胚胎细胞,RTG细胞 破骨细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)环腺苷酸钠，英文名或英文缩写：CAMP，Na，级别：试剂级，98%，规格：3000U

BT-20(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2(L-亮酸)
神经元细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)6-氨基-3-嘌呤(3MA)；细胞自噬抑制剂质量规格：HPLC≥97%,autophagy inhibitor3-MA;6-Amino-3-methylpurine

EPDR1 Others Human 人 EPDR1 人细胞裂解液 (阳性对照) ；2,6-二羟基嘌呤；质量规格：>99%,BR2,6-Dihydroxypurine；Xanthine

小鼠树突状细胞肉瘤低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);DG6-GFPNecrostatin1质量规格：>98%,RIP1抑制剂Necrostatin-1

HPAEpiC细胞，人肺泡上皮细胞 小鼠肾小球系膜细胞,MES-13细胞 CL-0090Hacat(人永生化角质形成细胞)5×106cells/瓶×2大豆分离蛋白质量规格：蛋白含量≥90%,BRSoy protein isolate

T-24(人膀胱癌细胞) 5×106cells/瓶×2S-2-羟基戊二酸质量规格：美国95%(2S)-2-Hydroxyglutaric Acid
测总NOST-NOS人前脂肪细胞*培养基 100mL海醇Iohexol质量规格：>98%,BR

MC细胞，大鼠巨噬细胞 THP-1(人单核细胞) 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS4A麦芽1酸化酶, 硫酸铵悬浮液Maltose Phosphorylase 5U/mg质量规格：BC Grade

EFNB1 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 标签)嗪草酮(>95%,植物激素级)Metribuzin质量规格：>95%,植物激素级

BC-019(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠瘤细胞;P388D1(IL-1)4-伞形酮酰-alpha-D-吡喃糖苷MU-alpha-GAL质量规格：分子生物学级

人卵巢腺癌细胞;SK-OV-3粘酸(>98%，BC)Mucic acid质量规格：>98%，BC
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。