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土壤漆酶测试盒可见分光光度法
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更新时间:2023-12-25  |  阅读:381

详情介绍

商品介绍:

测定意义:

漆酶(Laccase)是一种含铜的多酚氧化酶,属于铜蓝氧化酶家族,广泛分布于真菌和高等植物中,具有较强的氧化还原能力,在纸浆生物漂白,环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。

测定原理

漆酶分解底物ABTS产生ABTS自由基,在420nm处的吸光系数远大于底物ABTS,测定ABTS自由基的增加速率,可计算得漆酶活性。

自备实验用品及仪器

天平、常温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、震荡仪。

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

土壤漆酶测试盒可见分光光度法

50管/24样

可见分光光度法

BK-01S6875

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实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

250mL RNase-Free Tris-HCl Solution(无RNase的Tris-HCl溶液),1M,pH8.0   RNase-Free Tris-HCl Solution,1M,pH8.0   常温保存

100mL RNase-free Tris HCl,1M,pH 6.5  常温

2 ug pDC311 pDC311 低温运输,-20℃保存

疱肉基础 Cooked Meat Medium Base 250g

1g 鱼藤酮 Rotenone 室温避光保存

50T 兔黏液瘤病毒PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

2 g Sodium orthovanadate (酯抑制剂) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

250mL Glucose Solution(葡萄糖溶液),20%(W/V) Glucose Solution,20%(W/V) 常温保存

1个 暗盒(5×7英寸) Cassette 室温

500mL Blotto-Tween in TBS   Blotto-Tween in TBS   常温保存

季铵盐类中和剂管(带棉签)  10ml*20

土壤漆酶测试盒可见分光光度法USP9X  泛素特异性蛋白9X抗体 规格: 0.2ml

AUP1/Ancient ubiquitous protein 1  原始广泛存在蛋白1抗体 规格: 0.2ml

Insulin Receptor/CD220  胰岛素受体抗体 规格: 0.1ml

Elastin  弹性蛋白α抗体 规格: 0.1ml

SEZ6L  癫痫样相关蛋白6抗体 规格: 0.2ml

Destrin 19/ADF  肌动蛋白解聚因子19抗体 规格: 0.1ml

ECE2  内皮素转化2抗体 规格: 0.1ml

ADCK4  ADCK4蛋白抗体 规格: 0.2ml

MLN/Motilin  胃动素抗体 规格: 0.1ml

GSK-3 Beta (CT)  葡萄糖合成激-3β抗体 规格: 0.1ml

Collagen I  Ⅰ型胶原抗体 规格: 0.1ml

C17orf64  17号染色体开放阅读框64抗体 规格: 0.2ml

 


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