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中性、碱性土壤速效磷测试盒微量法
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更新时间:2023-12-24  |  阅读:413

详情介绍

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:中性、碱性土壤速效磷测试盒微量法

产品规格:100管/96样

检测方法:微量法

产品货号:BK-01S6908

产品分类:土壤系列
商品介绍:

测定意义:

速效磷是土壤中可被植物吸收的磷组分,包括全部水溶性磷、部分吸附态磷及有机态磷,土壤中速效磷是限制植物生长主要因子之一。

测定原理

用弱碱性提取碱溶性磷和吸附态磷,用钼锑抗比色法测定。

自备实验用品及仪器

天平、常温离心机、可见分光光度计、微量石英比色皿、震荡仪。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

1瓶 SW579 [SW-579]细胞株 SW579 [SW-579] 低温运输和保存

葡萄糖铵 Ammonium Dextrose Medium 250g

1g 埃文斯蓝 Evans Blue  室温干燥保存

阪崎肠杆菌检验  

100mL 印迹膜抗体稀释液 Antibody Dilution Buffer 4℃保存

2 ug SD1211-chip- 1 SD1211-chip- 1 低温运输,-20℃保存

48次 动态显色法内毒素定量试剂盒  

2 ug pEZZ18 pEZZ18 低温运输,-20℃保存

PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液  500ml*20瓶

1瓶 B16BL6细胞株 B16BL6 低温运输和保存

沙氏葡萄糖液体颗粒 Sabouraud’s Glucose Broth Medium 300ml/袋*10

中性、碱性土壤速效磷测试盒微量法MAD2  有丝分裂阻滞缺陷蛋白2抗体 规格: 0.2ml

C12ORF29  12号染色体开放阅读框29抗体 规格: 0.2ml

IRF7  干扰素调节因子7抗体 规格: 0.1ml

MCP-2/CCL8  单核细胞趋化蛋白2抗体(小鼠) 规格: 0.1ml

OXCT1  含氧酸辅A转移1抗体 规格: 0.2ml

PCNT/Pericentrin  中心粒周蛋白抗体 规格: 0.2ml

KRCC1  含赖卷曲螺旋蛋白1抗体 规格: 0.2ml

CCR6/CD196  细胞表面趋化因子受体6抗体 规格: 0.1ml

ITFG3/C16orf9  整联蛋白重复蛋白3抗体 规格: 0.2ml

phospho-Histone H1.4(Ser27)  磷酸化组蛋白H1,4样蛋白抗体 规格: 0.1ml

RYBP/APAP1/CD337  凋亡相关蛋白1抗体 0.2mlCRMP2/DPYSL2  二嘧啶相关蛋白2抗体 规格: 0.1ml

Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816)  磷酸化酪激A抗体 规格: 0.1mlphospho-AKT1/2/3 (Tyr315/316/312)   磷酸化蛋白激AKT1,2,3抗体 规格: 0.1ml 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

 

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