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实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
H2S含量测试盒微量法 | 100管/96样 | 微量法 | BK-01S6923 |
商品介绍:
测定意义: H2S是一种新型气态信号分子,存在于脑内的神经递质,生理浓度的H2S对神经系统海马的长时程增强功能具有重要的调节作用,并对自发性高血压、出血性休克及肝硬化等疾病的过程发挥着重要的病理生理效应。 测定原理 H2S与醋酸锌、N, N-二甲基对苯二胺和硫酸铁铵等反应生成亚甲基蓝,亚甲基蓝在665nm处有最大吸收峰,通过测定其吸光值可计算H2S含量。 自备实验用品及仪器 天平、低温离心机、可见分光光度计、微量石英比色皿、蒸馏水。 |
试剂组成和配制:
提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
操作步骤:
1. 样品的准备:
a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。
b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。
d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。
e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。
2. 试剂盒的准备工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。
b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。
2 ug pTALETF_v2 (NN) pTALETF_v2 (NN) 低温运输,-20℃保存
500U 甲酰胺 [fapy]-DNA 糖基化 FPG(Formamidopyrimidine DNA Glycosylase) -20℃保存
2 ug pDG1663 pDG1663 低温运输,-20℃保存
EG EG Medium 250g
25g 葡聚糖凝胶 G-50 中颗粒 Sephadex G-50 Medium 室温保存
50T 小肠结肠耶尔森菌PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
l mg Z-VAD-FMK(Caspase Inhibitor) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
250mL Glycine Buffer(缓冲液),0.2M,pH2.5 Glycine Buffer,0.2M,pH2.5 常温保存
5mL MgCl2溶液,25mM,PCR级 MgCl2,PCR Grade -20℃保存
2 ug pLAPSN pLAPSN 低温运输,-20℃保存
250mL 消化液(无EDTA) Trypsin Solution -20℃保存
H2S含量测试盒微量法ARRDC3 抑制蛋白结构域蛋白3抗体 规格: 0.2mlET-1 内皮素-1抗体 规格: 0.2ml
SNF5 转录调控激活蛋白SNF5抗体 规格: 0.2mlCCR-3 细胞表面趋化因子受体3抗体 规格: 0.1ml
phospho-CK18(Ser74) 磷酸化细胞角蛋白18抗体 规格: 0.1mlNOS-2/iNOS 氮合成-2抗体(诱导型) 规格: 0.1ml
MEGF5/Slit3 复合型表皮生因子样结构域蛋白5抗体 规格: 0.2mlHistone H3-like protein 组蛋白H3样抗体 规格: 0.2ml
phospho-ASK1(Ser967) 磷酸化细胞凋亡信号调节激1抗体 规格: 0.2mlKLK12 激肽释放12抗体 规格: 0.1ml
PICK1 蛋白激Cα相互作用蛋白1抗体 规格: 0.2mlphospho-Acinus(Ser1180) 磷酸化泡Acinus蛋白抗体 0.1ml
CD10/CALLA/Neprilysin CD10抗体 规格: 0.1mlChloramphenicol 抗体 规格: 0.2ml
Goat Anti-Mouse IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的羊抗小鼠IgM 规格: 0.1mlArfaptin 1 ADP核糖基化因子结合蛋白1抗体 规格: 0.1ml
APR3/C2orf28 凋亡相关蛋白3抗体 规格: 0.2mlPhospho-SGK1 (Ser78) 磷酸化糖皮质激素调节激1抗体 规格: 0.1ml
TTF-1 甲状核转录因子-1抗体 规格: 0.1mlMLC3F/MYL1/3 肌球蛋白轻链1/3抗体 规格: 0.2ml
Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr421/Ser424) 磷酸化核糖体S6蛋白激β2抗体 规格: 0.1ml
BPIL1 杀菌通透性增加蛋白样1抗体 规格: 0.2ml