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吲哚乙酸氧化酶测试盒可见分光光度法
参考价:

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更新时间:2023-12-23  |  阅读:608

详情介绍

商品介绍:

测定意义:

吲哚乙酸(IAA)在吲哚乙酸氧化酶的作用下,被氧化破坏失去活性。植物体内吲哚乙酸氧化酶活力的大小,对调节体内吲哚乙酸的水平,起着重要的作用,而影响植物的生长。

测定原理:

在无机酸存在情况下,吲哚乙酸能与FeCl3作用,生成红色螯合物,该物质在530nm处有最大吸收峰,酶活力的大小可以其破坏吲哚乙酸的速度表示之。吲哚乙酸的含量可用比色法测定。

自备仪器和用品:

低温离心机、水浴锅、可调节移液器、可见分光光度计、1.5mL离心管、1mL玻璃比色皿、和蒸馏水。

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

吲哚乙酸氧化酶测试盒可见分光光度法

50管/48样

可见分光光度法

BK-01S7021

11.png 

实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

改良马丁琼脂 Martin Agar Medium ,Medium 250g

1瓶 BxPC-3细胞株 BxPC-3 低温运输和保存

1000mL Tris Buffered Saline(TBS),10X,pH7.6  Tris Buffered Saline(TBS),10X,pH7.6  常温保存

1mL Protein G琼脂糖 Protein G Agarose 4℃保存

2 ug pTK-Luc pTK-Luc 低温运输,-20℃保存

100次 一步离心式石蜡清除剂 Paraffin Erasol 常温

2 ug pDsRed2-Nuc pDsRed2-Nuc 低温运输,-20℃保存

氯化钠胰蛋白胨稀释液 NaCl Tryptone Broth 250g

25g 氟化钠 Sodium Fluoride 室温保存

50T 乙型肝炎病毒PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

100次  H5N1神经抑制剂鉴定试剂盒 Oxidative Stress Detection Kit 常温保存

吲哚乙酸氧化酶测试盒可见分光光度法CCDC51  卷曲螺旋结构域蛋白51抗体 规格: 0.2ml

H1N1/H5N1/H3N2 nucleocapsid protein  A型毒核衣壳蛋白抗体 规格: 0.1ml

H1N1 Matrix Protein 1  A型禽毒H1N1蛋白抗体 规格: 1ml

SERBP1  纤溶原激活物抑制剂1 RNA结合蛋白抗体 规格: 0.2ml

ABCG4  ABC膜转运蛋白抗体 0.1ml

phospho-Cortactin (Tyr466)  磷酸化皮层肌动蛋白抗体 规格: 0.1ml

Mycobacterium  结核分枝杆菌抗体 规格: 0.2ml

phospho-ROCK2(Thr249)  磷酸化Rho相关蛋白激2抗体 规格: 0.1ml

KLF4  肠道内富含的Kruppel样因子/上皮锌指蛋白4抗体 规格: 0.1ml

AGTRAP  管紧张素Ⅱ受体相关蛋白抗体 规格: 0.2ml

RORB  维甲酸相关孤儿受体β抗体 规格: 0.2ml

FAM29A/HAUS6  FAM29蛋白抗体 规格: 0.2ml

 


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