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详情介绍
操作步骤:
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
我司供应的产品仅供科研使用,下列是产品属性:
产品全称:PP 小鼠蛋白磷酸酶ELISA检测试剂盒
英文名称:PP ELISA Kit
货号:BKE6684
规格:48T/96T
服务:可提供免费代测服务,以及产品说明书和技术指导等
保存环境:2-8℃低温、避光、防潮
主要成分:酶标板,试剂,标准品等。
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..需要而未提供。
试剂配制:
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
售后服务:
ELISA试剂盒需要有血清考核盘进行检测,根据检定报告了解其质量水平(按照质量计划选择灵敏度高的或特异性高的试剂),通过询问试剂包被物的组成,如原料来源(基因工程或合成多肽),片段的组合(按比例混合或化学合成),片段的长短等判断试剂的优劣。根据部门发布的试剂评价结果,可以了解市场上试剂的质量优劣。 | 质量保证: 检测用所有试剂全部都为进口试剂,适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本,灵敏度*。我们专业的ELISA技术服务,保证对所售任何产品一概负责到底,每一份实验结果都真实可靠!
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组成及试剂配制 :
1. 酶联板:一块(96孔)
2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
IgM 小鼠免疫球蛋白MELISA检测试剂盒 IgM ELISA Kit
BNP 小鼠脑钠素/脑钠尿肽ELISA检测试剂盒 BNP ELISA Kit
IgG 小鼠免疫球蛋白GELISA检测试剂盒 IgG ELISA Kit
IgE 小鼠免疫球蛋白EELISA检测试剂盒 IgE ELISA Kit
TE 小鼠端粒酶ELISA检测试剂盒 TE ELISA Kit
LTB4 小鼠白三烯B4ELISA检测试剂盒 LTB4 ELISA Kit
IL-1β 小鼠白介素1β ELISA检测试剂盒 IL-1β ELISA Kit
EGF 小鼠表皮生长因子ELISA检测试剂盒 EGF ELISA Kit
IL-1 小鼠白介素1ELISA检测试剂盒 IL-1 ELISA Kit
Col Ⅰ 小鼠Ⅰ型胶原ELISA检测试剂盒 Col ELISA Kit
PP 小鼠蛋白磷酸酶ELISA检测试剂盒50T 质型多角体病毒PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
10mg 化丙啶干粉 PI Powder -20℃干燥避光保存
100mL Imidazole Buffer(咪唑缓冲液),0.5M,pH6.0 Imidazole Buffer,0.5M,pH6.0 常温保存
200uL ROX参考染料 ROX Reference Dye 4℃或-20℃避光保存
2 ug pLVCT-tTR-KRAB pLVCT-tTR-KRAB 低温运输,-20℃保存
铁琼脂 250g
1瓶 NCI-H446细胞株 NCI-H446 低温运输和保存
菌种和底层琼脂 Medium I(foe Seed and Basal Layer) 250g
100g 水解乳蛋白 Bacto TC Lactalbumin Hydrolysate 室温保存
500mL Tris-HCl Buffer,1.0M,pH7.4 Tris-HCl Buffer,1.0M,pH7.4 常温保存
1mg 肽S 转移 GST(Glutathione S-Transferase) -20℃保存