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更新时间：2023-12-11 | 阅读：554
详情介绍
特别提醒：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。
产品名称：脱氢酶(DHA)测试盒可见分光光度法
产品规格：50管/48样
检测方法：可见分光光度法
产品货号：BK-01S6944
产品分类：其它系列
商品介绍：
测定意义: 脱氢酶(dehydrogenase, DHA) 是一类催化物质氧化还原反应的酶，催化底物通过细胞色素系统被氧化，释放的能量供机体使用，是生物体取得能量的一种方式。 测定原理 在细胞呼吸过程中，氢受体2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC）在脱氢酶作用下接受氢以后，被还原为三苯基甲鐟（Triphenyl Formazone, TF），TF呈现红色，于485nm测定其吸光值，即得脱氢酶活性。 自备实验仪器及用品 天平、恒温培养箱或水浴锅、低温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、冰、蒸馏水、甲醇（不允许快递，请用户自备）。 |
所需的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的测定：
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备
① 组织样本： 取约 0.1g 组织（水分充足的样本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4ºC 或冰浴进行 匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min，取上清作为待测液。 【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取
| ② 细菌/细胞样本： 先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）； 12000rpm 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。 【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（10 4）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。 ③ 液体样本：直接检测；若浑浊，离心后取上清检测。 |
实验方法学：
一、肝素的配制：
市售肝素冻干粉140单位/mg，1克瓶装，每瓶140，000单位，称取0.1克肝素冻干粉，加生理盐水5ml，配成2800单位/ml。取50～100μl湿润管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不会凝固。老鼠血易凝固，所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉，加3ml生理盐水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制备：取0.1克肝素冻干粉，加2.5ml生理盐水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，湿润管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），横向转动，每隔5～10分钟转动一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集：
全血根据收集的条件，分成不抗凝和抗凝两种。同时，不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清；抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1～2小时，直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血，轻轻颠倒充分抗凝后，可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征，选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。
选择抗凝的注意点：
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
1%NaCl蔗糖 20支
2 ug pYES4NT/C pYES4NT/C 低温运输，-20℃保存
50次 M13噬菌体单链基因组DNAout
2 ug pET-24a(+) pET-24a(+) 低温运输，-20℃保存
PBS缓冲液（PH7.4） PBS Solution 250g
1瓶 4647细胞株 4647 低温运输和保存
1盒 无内毒素枪头，1 mL
24 T 一氧化氮合成测试盒 Oxidative Stress Detection Kit 常温保存
250mL MES Buffer,1.0M,pH6.5 MES Buffer,1.0M,pH6.5 常温保存
250ug lambda（λ） DNA（不含N6-甲基腺） Lambda DNA（λ DNA） -20℃保存
2 ug pQE-40 pQE-40 低温运输，-20℃保存
脱氢酶(DHA)测试盒可见分光光度法IKBKE/IKKi 核因子κB抑制蛋白E抗体 规格: 0.1ml
DECR1 线粒体2,4-双烯酰辅A还原1抗体 规格: 0.1ml
phospho-c-Jun(Thr249) 磷酸化原基因c-Jun抗体 规格: 0.1mlphospho-G3BP1(Ser232) 磷酸化Ras GTP活化蛋白结合蛋白1抗体 规格: 0.1ml
Paxillin 桩蛋白Paxillin抗体 规格: 0.1mlCECR6 猫眼综合征染色体候选基因6抗体 规格: 0.2ml
REG1β/REG1 beta 胰岛细胞再生因子β抗体 规格: 0.2mlASAM/ACAM 脂肪细胞特异性粘附分子抗体 规格: 0.1ml
CTRP1/G protein coupled receptor interacting protein 1 G蛋白偶联受体相互作用蛋白1抗体（补体Clq TNF相关蛋白1） 规格: 0.2mlId1 DNA结合抑制因子1抗体 规格: 0.2ml
SLC27A1 链脂肪酸转运蛋白1抗体 规格: 0.2mlDR6/CD358 瘤细胞调亡素/瘤坏死因子受体死亡受体6抗体 规格: 0.2ml
PDZD6 PDZ结构域PDZK6蛋白抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的兔抗猴IgG 规格: 0.1ml
NCF/NCF4/p40phox 嗜中性粒细胞胞浆因子4抗体 规格: 0.1mlCK I alpha/STK 丝/苏蛋白质激抗体Casein kinase Ⅰα(CKⅠα) 规格: 0.1ml
SIRT6 沉默调节相关蛋白6抗体 规格: 0.2mlphospho-ERK5(Ser496) 磷酸化细胞外信号调节激5抗体 规格: 0.1ml
TSPAN2 四分子交联体2抗体（四旋蛋白） 规格: 0.2mlMyelin PLP 髓磷酯髓鞘蛋白1抗体 规格: 0.2ml
JMJD2A/KDM4A/JHDM3A 组蛋白去甲基化JMJ2A抗体 规格: 0.2mlAlpha-Synuclein/Syn/SNCA 核突触蛋白α抗体 规格: 0.1ml
注意事项：
1、试剂二为酶，不可冷冻，使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于2，建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用（10μl试剂二原液+60μl蒸馏水）。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管，对照管数值在什么范围？
对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是（1）试剂二或试剂四没有现配现用；（2)没有按顺序加试剂；（3）反应时间不够，可以延长反应时间（反应时间30min可以延长到40min）。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管，可能是样本中杂质的影响太大，为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测，通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。
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